Zeinab Fadaie

versterken of verzwakken. Gebruik makend van deze voorspellingen konden we kandidaat varianten
beter selecteren.

Hoofdstuk 3.2 beschrijft de identificatie van een RNA splice site variant (c.7N8H2PG>A) die aanwezig
is buiten de consensus splice site sequentie in TULPN. De variant werd door WES geïdentificeerd bij
een broer en zus met vroegoptredende retinitis pigmentosa bij wie eerder een andere pathogene
missense variant in TULPN werd gevonden. De c.7N8H2PG>A variant heeft geen significant effect op de
splice donor site van exon 7. Echter de balans wordt verstoord tussen de versterker en verzwakker
motieven in deze positie en leidt tot een splice defect. Dit hoofdstuk belicht de belangrijke rol van
geconserveerde motieven in de splicing processen.

De nadruk in hoofdstuk 3.3 ligt op het effect van varianten in cis op de resulterende eiwitfunctie. We
beschreven twee niet-verwante families met vitelliforme macula-dystrofie met ziekte aanvang op
volwassen leeftijd die een complex allel in IMPG2 dragen (c.[3023-NST>AIPO2PG>A]) na analyse van
WES-gegevens. De c.PO2PG>A variant is niet alleen een mogelijke pathogene missense mutatie op
zichzelf, maar fungeert ook als een modificerend element voor c.3023-NST>A door het splice defect
als gevolg van deze variant te versterken. In beide families ontwikkelden individuen die dit complexe
allel op een heterozygote manier droegen niet altijd een macula dystrofie, wat het belang onderstreept
van andere genetische en omgevingsfactoren die bijdragen aan deze ziekte.

Hoofdstuk 3.4 werpt licht op de pathogene rol van een ‘branchpoint’ variant (c.592-2NA>T) in BBSN
in vier niet-verwante families met niet-syndromale retinitis pigmentosa die c.NNS9T>G droegen, de
meest voorkomende variant in BBSN, in de andere allel. De branchpoint-variant werd geïdentificeerd
door middel van WGS-analyse en het complexe splice defect werd gevonden met behulp van in vitro
midigene splice-assays. In dit hoofdstuk wordt de eerste pathogene branchpoint variant beschreven die
in IRDs wordt gerapporteerd.

Hoofdstuk 4 beschrijft een uitgebreide studie waarin 100 individuen met verschillende IRDs werden
bestudeerd m.b.v. WGS. De index patiënten waren eerder gescreend via WES of gen-specifieke
sequencing en waren genetisch nog niet opgelost. De WGS-analyse werd uitgevoerd met speciale
aandacht voor de niet-coderende varianten en de mogelijk causale varianten werden onderzocht m.b.v. 7
in vitro functionele assays om de pathogeniciteit te bewijzen. We bieden een moleculaire diagnose voor
27% van de vooraf gescreende gevallen en suggereren een verdere verbetering van
sequentietechnologieën en interpretatie van varianten om de diagnostische opbrengst voor IRDs te
verhogen.

Hoofdstuk 5 illustreert de implementatie van een nieuwe strategie voor de identificatie van het
genetisch defect in IRDs met een sterke correlatie tussen genotype en fenotype. In een familie met
choroideremie toonde eerdere RNA-analyse van een patiënt het overslaan van CHM exon 12, maar
het onderliggende DNA-defect bleef 18 jaar lang ongrijpbaar. Met behulp van optische genoom mapping
en WGS waarin lange DNA-moleculen werden geanalyseerd, werd een omgekeerde duplicatie in CHM
geïdentificeerd. We hebben een model verstrekt dat de oorsprong van de SV aantoont door middel
van ‘fork stalling and a template switching/microhomology-mediated break-induced replication
mechanism’. Daarnaast speculeerden we over het mechanisme van het splice defect en stelden we de
vorming voor van een secundaire RNA-structuur die de splicing van exon 12 verstoorde. Dit hoofdstuk
benadrukt de grote mogelijkheden van optische genoom mapping en lange moleculen WGS om de
verborgen SVs in onopgeloste gevallen te ontrafelen evenals de ondergewaardeerde rol van
veranderingen van de secundaire structuur van RNA als ziektemechanisme.

Ten slotte geeft Hoofdstuk 6 een algemene bespreking van de belangrijkste bevindingen in dit
proefschrift en hun implicaties voor een verbeterde diagnose van IRDs. De toepassing van verschillende
sequentietechnologieën en hun voor en nadelen worden uitgelegd. Het belang van branchpoint
varianten, complexe allelen en varianten die de secundaire RNA-structuur beïnvloeden, werd
besproken. Bovendien werd de behoefte aan nauwkeurige splicing voorspellingsprogramma’s verklaard
door verschillende voorspellingsalgoritmen te vergelijken en hun belang in in vitro functionele
splicingtesten te benadrukken. Ten slotte werden mogelijke redenen voor het missen van pathogene
varianten in de bestudeerde cohort besproken en werd gepostuleerd dat de toepassing van lange DNA-
moleculen sequencing een belangrijke techniek kan zijn voor de toekomst van IRDs en andere
genetische aandoeningen. Daarnaast kunnen de verschillende cellulaire systemen voor in vitro
functionele analyse lichtschijnen op gemiste oorzaken van IRDs in de toekomst.

Simpele

We krijgen ons erfelijk materiaal van onze ouders. Dit erfelijk materiaal is het DNA. We krijgen van
elke ouder één kopie van het DNA. Maar wat is DNA? DNA is het boek van het leven. Het heeft
verschillende hoofdstukken die genen worden genoemd. Het alfabet van dit boek bestaat uit slechts
vier letters, namelijk A, T, G en C. Elk gen bevat instructies voor het maken van een eiwit. Eiwitten
zijn de bouwstenen van ons lichaam; het zijn de eiwitten die ons eten verteren, die onze botten
stevigheid geven, die onze spieren doen bewegen, die onze ogen laten zien etc. Om een eiwit te maken
worden de instructies uit het gen eerst gekopieerd in RNA. De RNA kopieën worden gebruikt om
eiwitten te maken.
Het RNA is een kopie van een gen en bevat dus dezelfde informatie als het gen. Maar niet alle informatie
is nodig om een eiwit te maken. Sommige pagina’s bevatten belangrijke instructies om het eiwit te
maken. Deze pagina’s worden exonen genoemd. De andere pagina's, die tussen de exonen in liggen,
zijn niet belangrijk en worden intronen genoemd. De niet-belangrijke pagina's (intronen) moeten
worden verwijderd voordat de RNA kopie gebruikt kan worden om een eiwit te maken.
Er zijn verschillende technologieën die het complete levensboek (DNA) kunnen lezen of alleen de
belangrijke pagina's ervan (exonen). Met behulp van deze technologieën kunnen we verschillen tussen
personen of afwijkingen ontdekken. Sommige afwijkingen zijn niet schadelijk: de instructies kunnen
nog steeds gebruikt worden om een functioneel eiwit te maken. Maar andere afwijkingen zijn schadelijk.
Deze afwijkingen worden mutaties genoemd. Als deze fouten (mutaties) voorkomen in een van de
hoofdstukken, kloppen de instructies voor het maken van een eiwit niet meer. In dit geval worden er
niet-werkende eiwitten gemaakt of zelfs helemaal geen eiwitten. De schadelijke fouten (mutaties)
kunnen voorkomen in de hoofdstukken (genen) die blindheid kunnen veroorzaken. In mijn
promotieproject gebruikten we verschillende technologieën en probeerden we deze schadelijke fouten
te vinden in oog-gerelateerde genen. Bovendien wilden we begrijpen hoe de instructies voor het maken
van eiwitten door de fouten wordt veranderd.
Deze schadelijke fouten kunnen voorkomen op de belangrijke pagina's (exonen). Maar ze kunnen ook
voorkomen op de niet-belangrijke pagina's (intronen) die verwijderd moeten worden. Mijn
promotieproject richt zich op de fouten in de niet-belangrijke pagina's. Het is niet altijd gemakkelijk
om te interpreteren hoe de instructies voor het maken van eiwitten zullen veranderen door de fouten
in de niet-belangrijke pagina's. Er kan bijvoorbeeld een schadelijke fout in het midden van een niet-
belangrijke pagina staan die ervoor zorgt dat er een extra stap wordt toegevoegd aan de
bouwinstructies voor een eiwit. Op deze manier bevat de kopie (RNA) te veel informatie. De
eiwitfabriek leest ook de extra informatie en resulteert in misvormde eiwitten of helemaal geen
eiwitten. Het gevolg is dat dat specifieke eiwit zijn werk niet kan doen. We hebben verschillende
voorbeelden van deze fouten gevonden, zoals is te lezen in hoofdstuk 3.1 en hoofdstuk 4 van mijn
proefschrift.
Soms bevinden de schadelijke fouten zich op de overgang van een belangrijke pagina (exon) naar een
niet-belangrijke pagina (intron). De gevolgen van deze schadelijke fouten zijn verschillend. Soms
verwijderen ze (een deel van) een belangrijke pagina. Hierdoor kan er geen gezond eiwit worden
gemaakt. Andere keren blijft een deel van de niet-belangrijke pagina op de belangrijke pagina staan en
wordt niet verwijderd. Dat leidt uiteindelijk ook tot verkeerde instructies en een niet-functioneel eiwit.
In mijn proefschrift vonden we verschillende van deze schadelijke fouten, zoals is te lezen in
Hoofdstuk 3 en Hoofdstuk 4.
De schadelijke fouten bestaan niet altijd uit slechts één letter. Ze kunnen ook groter zijn. In dat geval
zijn er meerdere pagina's of hoofdstukken gekopieerd of verwijderd. Verder kan de volgorde van de
pagina’s of de hoofdstukken veranderd zijn. Deze fouten leiden er eveneens toe dat de instructies voor
het maken van eiwitten niet meer kloppen en daardoor worden er geen functionele eiwitten meer

Simpele

gemaakt. In Hoofdstuk 4 en Hoofdstuk 5 van mijn proefschrift hebben we enkele van deze grote
schadelijke fouten beschreven.

Tijdens mijn promotieonderzoek hebben we veel schadelijke kleine en grote fouten ontdekt die de
instructies voor het maken van eiwitten beïnvloeden. Alleen als we weten hoe de instructies zijn
veranderd, kunnen we een manier vinden om de fouten te herstellen, zodat er weer een functioneel
eiwit gemaakt kan worden. Mijn onderzoek is een eerste stap in dit proces en maakt het op termijn
mogelijk om patiënten met een erfelijke vorm van slechtziendheid te kunnen helpen.

هدﺎﺳ نﺎﺑز ﻪﺑ ﯽﺳرﺎﻓ ﻪﺻﻼﺧ

ﻪﺨﺴﻧ ﮏﯾ ردﺎﻣ ﺎﯾ رﺪﭘ ﺮﻫ زا ﺎﻣ و دﻮﺷ ﯽﻣ هﺪﯿﻣﺎﻧ DNA ﯽﺛرا هدﺎﻣ ﻦﯾا . ﻢﯾﺮﺑ ﯽﻣ ثرا ﻪﺑ دﻮﺧ نارﺪﭘ و ناردﺎﻣ زا ار دﻮﺧ ﯽﺘﺛارو داﻮﻣ ﺎﻣ
هﺪﯿﻣﺎﻧ نژ ﻪﮐ دراد ﯽﻔﻠﺘﺨﻣ یﺎﻫ ﻞﺼﻓ بﺎﺘﮐ ﻦﯾا .ﺖﺳا دﺮﻓ ﺮﻫ ﯽﮔﺪﻧز بﺎﺘﮐ DNA ؟ﺖﺴﯿﭼ DNA ﺎﻣا .ﻢﯿﻨﮐ ﯽﻣ ﺖﻓﺎﯾرد DNA زا
نﺎﯿﺑ ار صﺎﺧ ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ نﺎﺘﺳ اد ﮏﯾ (نژ) ﻞﺼﻓ ﺮﻫ .ﺖﺳا هﺪﺷ ﻞﯿﮑﺸﺗ G و C ، T ، A فﺮﺣ رﺎﻬﭼ زا ﻂﻘﻓ بﺎﺘﮐ ﻦﯾا یﺎﺒﻔﻟا . ﺪﻧﻮﺷ ﯽﻣ
لﻮﻠﺳ ﻪﺘﺴﻫ رد DNA : دراد دﻮﺟو ﻞﮑﺸﻣ ﮏﯾ ، رﺎﮐ ﻦﯾا مﺎﺠﻧا یاﺮﺑ لﺎﺣ ﻦﯾا . ﺎﺑ دور رﺎﮐ ﻪﺑ ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ ﺖﺧﺎﺳ یاﺮﺑ ﺪﻧاﻮﺗ ﯽﻣ ﻪﮐ ﺪﻨﮐ ﯽﻣ
ﻪﺑ ار دﻮﺧ تﺎﻋﻼﻃا ،دﻮﺷ جرﺎﺧ ﻪﺘﺴﻫ زا ﺪﻧاﻮﺗ ﯽﻤﻧ DNA ﻪﮐ ﺎﺠﻧآ زا . ﺪﻨﺘﺴﻫ ﻪﺘﺴﻫ زا جرﺎﺧ رد ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ ﺖﺧﺎﺳ مﺎﺧ داﻮﻣ ﺎﻣا ﺖﺳا
ﻪﺑ ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ ﺖﺧﺎﺳ یاﺮﺑ ار تﺎﻋﻼﻃا و ﺪﻨﮐ کﺮﺗ ار ﻪﺘﺴﻫ ﺪﻧاﻮﺗ ﯽﻣ نﺎﺳر مﺎﯿﭘ ﻦﯾا .ﺪﻫد ﯽﻣ نﺎﺳر مﺎﯿﭘ RNA مﺎﻧ ﻪﺑ یﺮﮕﯾد لﻮﮑﻟﻮﻣ
.ﺪﻧﺎﺳﺮﺑ لﻮﻠﺳ ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ ﻪﻧﺎﺧرﺎﮐ

رد ﻪﮐ رﻮﻄﻧﺎﻤﻫ . ﺪﻨﺘﺴﯿﻧ یروﺮﺿ تﺎﻋﻼﻃا ﻦﯾا ﻪﻤﻫ ،لﺎﺣ ﻦﯾا . ﺎﺑ ﺪﻨﮐ ﯽﻣ ﺖﻓﺎﯾرد ( نژ ) ﻞﺼﻓ ﺮﻫ ار زا تﺎﻋﻼﻃا ﻪﯿﻠﮐ نﺎﺳر مﺎﯿﭘ RNA
نوﺰﮔا ﻪﮐ ﺪﻨﺘﺴﻫ ﻢﻬﻣ رﺎﯿﺴﺑ نﺎﺘﺳاد ﻦﯾا کرد یاﺮﺑ تﺎﺤﻔﺻ زا ﯽﺧﺮﺑ . ﺪﻨﮐ ﯽﻣ نﺎﯿﺑ ار ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ نﺎﺘﺳاد ﮏﯾ ﻞﺼﻓ ﺮﻫ ،ﺪﺷ ﺮﮐذ ﻻﺎﺑ
( نوﺮﺘﻨﯾا ) ﻂﺒﺗﺮﻣﺮﯿﻏ تﺎﺤﻔﺻ . ﺪﻨﯾﻮﮔ ﯽﻣ نوﺮﺘﻨﯾا ﺎﻬﻧآ و ﻪﺑ ﺪﻨﺘﺴﯿﻧ ﻂﺒﺗﺮﻣ نﺎﺘﺳاد ، ﺎﺑ نوﺰﮔا ﻦﯿﺑ رد ،ﺮﮕﯾد تﺎﺤﻔﺻ و ﺪﻧﻮﺷ ﯽﻣ هﺪﯿﻣﺎﻧ
. دﻮﺷ ﻪﺘﺧﺎﺳ ﻢﻟﺎﺳ ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ ﮏﯾ ﺎﻬﺘﻧا رد ﺎﺗ ﺪﻧﻮﺷ اﺪﺟ ﻪﺘﺴﻫ زا جرﺎﺧ ﻪﺑ نﺎﺳر مﺎﯿﭘ لﺎﺳرا زا ﻞﺒﻗ ﺪﯾﺎﺑ

. ﺎﺑ ﺪﻧاﻮﺨﺑ ار ( ﺎﻫ نوﺰﮔا ) نآ ﻢﻬﻣ تﺎﺤﻔﺻ ﺎﻬﻨﺗ ﺎﯾ ﻞﻣﺎﮐ رﻮﻃ ار ﻪﺑ ( DNA ) ﯽﮔﺪﻧز بﺎﺘﮐ فوﺮﺣ ﺪﻧاﻮﺗ ﯽﻣ ﻪﮐ دراد دﻮﺟو یروﺎﻨﻓ ﻦﯾﺪﻨﭼ
ﺪﯿﻟﻮﺗ ﻪﻧﺎﺧرﺎﮐ و ﺪﻨﺘﺴﯿﻧ روآ نﺎ ز ﯾ تﺎﻫﺎﺒﺘﺷا زا ﯽﺧﺮﺑ . ﺖﻓﺎﯾ ار بﺎﺘﮐ ﻦﯾا رد دﻮﺟﻮﻣ تﺎﻫﺎﺒﺘﺷا ناﻮﺗ ﯽﻣ ﺎﻫ یروﺎﻨﻓ ﻦﯾا زا هدﺎﻔﺘﺳا
رﺎﯿﺴﺑ تﺎﻫﺎﺒﺘﺷا زا ﯽﺧﺮﺑ ، لﺎﺣ ﻦﯾا . ﺎﺑ دزﺎﺴﺑ ﯽﻤﻟﺎﺳ و بﻮﺧ ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ نآ و زا ﺪﻧاﻮﺨﺑ ار نﺎﺘﺳاد ﺪﻧاﻮﺗ ﯽﻣ نﺎﻨﭽﻤﻫ لﻮﻠﺳ رد ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ
ﻦﮑﻤﻣ ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ ﻪﻧﺎﺧرﺎﮐ ، ﺪﺘﻔﯿﺑ قﺎﻔﺗا ﺎﻫ ﻞﺼﻓ زا ﯽﮑﯾ رد ( ﺎﻫ ﺶﻬﺟ ) تﺎﻫﺎﺒﺘﺷا ﻦﯾا ﺮﮔا . ﺪﻧﻮﺷ ﯽﻣ هﺪﯿﻣﺎﻧ ﺶﻬﺟ ﻪﮐ ﺪﻨﺘﺴﻫ روآ نﺎ ز ﯾ
ﻢﻟﺎﺳﺎﻧ ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ و ﺎﯾ ﺖﺷاد ﻢﯿﻫاﻮﺨﻧ ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ ﭻﯿﻫ ﺎﯾ ﺖﻟﺎﺣ ﻦﯾا رد . ﺪﻧاﻮﺨﺑ ار نآ ﺪﻧاﻮﺘﻧ ًﻼﺻا ﺎﯾ ﺪﻨﮐ ﺮﯿﺒﻌﺗ ﻮﺳ ار ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ نﺎﺘﺳاد ﺖﺳا
ﯽﯾﺎﻨﯿﺑﺎﻧ ﻪﺑ ﺮﺠﻨﻣ ﺪﻧاﻮﺗ ﯽﻣ ﻪﮐ ﺪﻨﻫد خر ﻢﺸﭼ ﻪﺑ طﻮﺑﺮﻣ ی ( ﺎﻫ نژ ﺎﻫ ) ﻞﺼﻓ رد ﺖﺳا ﻦﮑﻤﻣ ( ﺎﻫ ﺶﻬﺟ ) تﺎﻫﺎﺒﺘﺷا . ﺪﺷ ﺪﻫاﻮﺧ ﺪﯿﻟﻮﺗ
یﺎﻫ نژ رد ار ( ﺎﻫ ﺶﻬﺟ ) تﺎﻫﺎﺒﺘﺷا ﻦﯾا ﻢﯾدﺮﮐ ﯽﻌﺳ و ﻢﯾدﺮﮐ هدﺎﻔﺘﺳا ﯽﻔﻠﺘﺨﻣ یﺎﻫ یروآ ﻦﻓ زا ﺎﻣ ،ﻦﻣ یاﺮﺘﮐد هژوﺮﭘ رد . دﻮﺷ
کرد و ﯽﻨﯿﺑ ﺶﯿﭘ تﺎﻫﺎﺒﺘﺷا ﻦﯾا سﺎﺳا ﺎﻫ ار ﺮﺑ ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ ﻪﺘﻓﺎﯾ ﺮﯿﯿﻐﺗ نﺎﺘﺳاد ﻢﯾدﺮﮐ شﻼﺗ ﺎﻣ ،ﻦﯾا ﺮﺑ هوﻼﻋ . ﻢﯿﻨﮐ اﺪﯿﭘ ﻢﺸﭼ ﻪﺑ طﻮﺑﺮﻣ
. ﻢﯿﻨﮐ
ﻪﮐ ( ، ﺎﻫ نوﺮﺘﻨﯾا ) ﻂﺒﺗﺮﻣﺮﯿﻏ تﺎﺤﻔﺻ رد دراد نﺎﮑﻣا ﻦﯿﻨﭽﻤﻫ . ﺪﺘﻔﯿﺑ قﺎﻔﺗا ( ﺎﻫ نوﺰﮔا ) ﻢﻬﻣ تﺎﺤﻔﺻ رد تﺎﻫﺎﺒﺘﺷا ﻦﯾا ﺖﺳا ﻦﮑﻤﻣ
نﺎﺘﺳاد کرد و ﺮﯿﺴﻔﺗ . ﺖﺳا ﺰﮐﺮﻤﺘﻣ ﻂﺒﺗﺮﻣ ﺮﯿﻏ تﺎﺤﻔﺻ رد تﺎﻫﺎﺒﺘﺷا یور ﻦﻣ یاﺮﺘﮐد ی هژوﺮﭘ . ﺪﺘﻔﯿﺑ قﺎﻔﺗا ﺰﯿﻧ ،ﺪﻧﻮﺷ فﺬﺣ ﺪﯾﺎﺑ
هﺎﺒﺘﺷا ﮏﯾ ﺖﺳا ﻦﮑﻤﻣ ،لﺎﺜﻣ ناﻮﻨﻋ ﻪﺑ . ﺖﺴﯿﻧ نﺎﺳآ ﻪﺸﯿﻤﻫ ﻂﺒﺗﺮﻣ ﺮﯿﻏ تﺎﺤﻔﺻ رد تﺎﻫﺎﺒﺘﺷا داﺪﺧر ﻞﯿﻟد ﻪﺑ ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ ﻪﺘﻓﺎﯾ ﺮﯿﯿﻐﺗ
ﻪﺑ . ﺪﻨﮐ ﻪﻓﺎﺿا ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ نﺎﺘﺳاد ار ﻪﺑ ﯽﻓﺎﺿا ﺖﺳردﺎﻧ تﺎﻋﻼﻃا ﺪﻧاﻮﺗ ﯽﻣ ﻪﮐ ﺪﺷﺎﺑ ﻪﺘﺷاد دﻮﺟو ( نوﺮﺘﻨﯾا ) ﻂﺒﺗﺮﻣ ﺮﯿﻏ ﻪﺤﻔﺻ ﻂﺳو رد
نﺎﺘﺳاد ﻦﯾا ﺰﯿﻧ ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ ﺪﯿﻟﻮﺗ ﻪﻧﺎﺧرﺎﮐ . دﻮﺷ ﯽﻤﻧ اﺪﺟ و ﺪﻧﺎﻣ ﯽﻣ ﯽﻗﺎﺑ نﺎﺳر مﺎﯿﭘ رد ﻂﺒﺗﺮﻣ ﺮﯿﻏ ﻪﺤﻔﺻ ﻦﯾا زا ﯽﺸﺨﺑ ،ﺐﯿﺗﺮﺗ ﻦﯾا
لﻮﻠﺳ رد صﺎﺧ ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ نآ ﻪﮐ ﺖﺳا ﻦﯾا ﻪﺠﯿﺘﻧ . ﺪﺳﺮﯿﻤﻧ مﺎﻤﺗا و ﻪﺑ هﺪ ﺷ ﻒﻗﻮﺘﻣ نﺎﺘﺳاد ﻂﺳاوا رد ًﻻﻮﻤﻌﻣ ﻪﮐ ﺪﻧاﻮﺧ ﯽﻣ ار ﻢﻟﺎﺳﺎﻧ
4 ﻞﺼﻓ و ۳.۱ ﻞﺼﻓ رد ار ﺎﻫ نآ سﺎﺳا ﺮﺑ ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ نﺎﺘﺳاد ﺮﯿﯿﻐﺗ ﯽﮕﻧﻮﮕﭼ و تﺎﻫﺎﺒﺘﺷا ﻦﯾا زا ﻪﻧﻮﻤﻧ ﻦﯾﺪﻨﭼ ﺎﻣ . ﺪﺷ ﺪﻫاﻮﺨﻧ ﺪﯿﻟﻮﺗ ﺎﻫ
. ﻢﯾداد حﺮﺷ ﻪﻣﺎﻧ نﺎﯾﺎﭘ ﻦﯾا

توﺎﻔﺘﻣ تﺎﻫﺎﺒﺘﺷا ﻦﯾا ﺐﻗاﻮﻋ . ﺪﻧراد راﺮﻗ ( نوﺮﺘﻨﯾا ) ﻂﺒﺗﺮﻣﺮﯿﻏ ﻪﺤﻔﺻ و ( نوﺰﮔا ) ﻢﻬﻣ ﻪﺤﻔﺻ یﺎﻫزﺮﻣ رد روآ نﺎ ز ﯾ تﺎﻫﺎﺒﺘﺷا ، ﯽﻫﺎﮔ
ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ نﺎﺘﺳاد زا ﯽﺸﺨﺑ ﻪﺠﯿﺘﻧ رد . ﺪﻨﻨﮐ ﯽﻣ فﺬﺣ ار نآ زا ﯽﺸﺨﺑ ﺎﯾ ﻞﻣﺎﮐ رﻮﻃ ﻪﺑ ار ﻢﻬﻣ ﻪﺤﻔﺻ ﮏﯾ ﺎﻫ نآ ، دراﻮﻣ ﯽﺧﺮﺑ رد . ﺖﺳا
ﯽﻣ ﯽﻗﺎﺑ ﻢﻬﻣ ﻪﺤﻔﺻ ﺎﺑ ﻂﺒﺗﺮﻣ ﺮﯿﻏ ﻪﺤﻔﺻ زا ﯽﺸﺨﺑ ،ﺮﮕﯾد ﻊﻗاﻮﻣ رد . دزﺎﺴﺑ ﻢﻟﺎﺳ ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ ﮏﯾ ﺪﻧاﻮﺗ ﯽﻤﻧ ﻪﻧﺎﺧرﺎﮐ و دﻮﺷ ﯽﻣ فﺬﺣ
ﻦﯾﺪﻨﭼ ،ﻦﻣ ﻪﻣﺎﻧ نﺎﯾﺎﭘ رد . دﻮﺷ ﯽﻣ ﻢﻟﺎﺳﺎﻧ ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ و هﺎﺒﺘﺷا نﺎﺘﺳاد ﮏﯾ ﻪﺑ ﺮﺠﻨﻣ ﺎﻬﺘﻧا رد ﻦﯿﻨﭽﻤﻫ ﻪﮐ ،دﻮﺷ ﯽﻤﻧ اﺪﺟ نآ و زا ﺪﻧﺎﻣ
. ﺖﺳا هﺪﺷ هداد ﺢﯿﺿﻮﺗ و ﯽﺳرﺮﺑ 4 ﻞﺼﻓ 3 و ﻞﺼﻓ رد ﺎﻫ ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ نﺎﺘﺳاد ﺮﺑ ﺎﻫ نآ تاﺮﺛا و تﺎﻫﺎﺒﺘﺷا ﻦﯾا زا درﻮﻣ

و ﻞﺼﻓ ﺎﯾ ﻪﺤﻔﺻ ﻦﯾﺪﻨﭼ ﺮﯿﺜﮑﺗ ﺎﯾ فﺬﺣ ﯽﮔرﺰﺑ ﻪﺑ ﺪﻨﻧاﻮﺗ ﯽﻣ ﻦﯿﻨﭽﻤﻫ دراﻮﻣ ﻦﯾا . ﺪﻨﺘﺴﯿﻧ فﺮﺣ ﮏﯾ ﻂﻘﻓ ﻪﺸﯿﻤﻫ روآ نﺎ ز ﯾ تﺎﻫﺎﺒﺘﺷا
ﺪﯿﻟﻮﺗ ﻪﻧﺎﺧرﺎﮐ . ﺪﻨﺘﺴﻫ ی روآ نﺎ ز ﯾ رﺎﯿﺴﺑ تﺎﻫﺎﺒﺘﺷا ﺰﯿﻧ ﺎﻫ ﻦﯾا . ﺪﻨﺷﺎﺑ ﺎﻫ ﻞﺼﻓ ﻦﯿﺑ ﯽﺘﺣ ﺎﯾ ﻞﺼﻓ ﮏﯾ رد تﺎﺤﻔﺻ ندﺮﮐ ﺎﺟ ﻪﺑ ﺎﺟ ﺎﯾ

Persian