{"id":8863,"date":"2026-04-07T09:01:49","date_gmt":"2026-04-07T09:01:49","guid":{"rendered":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/portfolio\/malou-janssen\/"},"modified":"2026-04-23T08:32:22","modified_gmt":"2026-04-23T08:32:22","slug":"malou-janssen","status":"publish","type":"us_portfolio","link":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/portfolio\/malou-janssen\/","title":{"rendered":"Malou Janssen"},"content":{"rendered":"","protected":false},"excerpt":{"rendered":"","protected":false},"author":8,"featured_media":13647,"comment_status":"closed","ping_status":"closed","template":"","meta":{"_acf_changed":false,"footnotes":""},"us_portfolio_category":[45],"class_list":["post-8863","us_portfolio","type-us_portfolio","status-publish","has-post-thumbnail","hentry","us_portfolio_category-new-template"],"acf":{"naam_van_het_proefschift":"Development, Specificity and Local Recruitment of Lymphocytes Contributing to Central Nervous System Demyelinating Disease","samenvatting":"Multiple sclerosis (MS), neuromyelitis optica spectrum disorders (NMOSD) en myeline oligodendrocyt glycoprote\u00efne (MOG) antistof geassocieerde ziekte (MOGAD) zijn demyeliniserende ziekten van het centrale zenuwstelsel (CZS). Hoewel deze ziekten verschillen in pathologie, incidentie en pati\u00ebntkarakteristieken, hebben ze gemeenschappelijk dat er een afwijkende reactie van lymfocyten ten grondslag ligt aan de immunopathologie van de ziekten. In dit proefschrift is gekeken naar specificiteit, lokale verrijking en ontwikkeling van verschillende groepen lymfocyten die zijn betrokken bij de pathogenese van deze drie ziekten.\n\nHoofdstuk 1 introduceert de huidige stand van zaken van de wetenschap omtrent MS, NMOSD en MOGAD en de betrokken lymfocyten. Gelijkenissen en verschillen tussen deze ziekten worden behandeld alsook de veranderende kijk op de pathogenese door de jaren heen, aangezien daar de nodige wijzigingen in zijn opgetreden.\n\nHoofdstuk 2 kijkt naar de antigeen specificiteit van T-cellijnen die zijn gehaald uit hersenvocht van pati\u00ebnten met MS. Om dit goed te kunnen bestuderen, is er gebruik gemaakt van autologe B-cellen die onsterfelijk gemaakt zijn middels EBV infectie en via transductie \u00e9\u00e9n van een geselecteerd panel van kandidaat antigeen tot expressie brengen (contactin-2, kaliumkanaaleiwit, myeline geassocieerd glycoprote\u00efne, myeline basiseiwit, myeline oligodendrocyt glycoprote\u00efne, neurofascine, proteolipide eiwit en SNOOB eiwit). Deze manier van antigeen presentatie maakte het uitlokken van antigeen specifieke responsen bij zowel CD4+ als CD8+ T-cellen mogelijk. Er werd geen significante antigeen specifieke reactiviteit van de T-cellijnen gevonden tegen dit panel van kandidaat MS antigenen.\n\nIn hoofdstuk 3 vonden we dat aanwezigheid van de specifieke Th17.1 subset, die zowel op Th1 als Th17 lijkt, gecorreleerd was met vroege ziekteactiviteit in MS. De subset produceert significante hoeveelheden IFN-\u03b3 en GM-CSF en een kleine hoeveelheid IL-17. Th17.1 waren verlaagd aanwezig in het bloed van pati\u00ebnten die snel MS ontwikkelden, verrijkt in MS hersenvocht en breinweefsel en hadden een groot migrerend vermogen over een cellaag met brein endotheelcellen in vitro. In het bloed van pati\u00ebnten die werden behandeld met natalizumab, een VLA4 antistof, werd een selectieve ophoping van dit celtype gezien waarschijnlijk door verminderde migratie naar het CZS. In pati\u00ebnten die ondanks natalizumab behandeling toch een nieuwe aanval kregen, vond geen ophoping van Th17.1 plaats, suggererend dat niet effectieve blokkade van de Th17.1 in deze pati\u00ebnten bijdraagt aan de ontwikkeling van MS schubs.\n\nKijkend naar B-cellen in hoofdstuk 4, ontdekten we dat een CXCR3+ celtype selectief verrijkt was in het CZS (hersenvocht, meningen en hersenweefsel) vergeleken met bloed. Het migrerend vermogen van deze cellen naar het brein werd ondersteund door vergelijkbare in vitro en ex vivo bevindingen als in hoofdstuk 3. Tijdens in vitro kweken met Tfh-condities zorgde toevoeging van IFN-\u03b3 vooral voor het ontstaan van plasmablasten. Als daarbovenop nog Toll like receptor (TLR) 9 ligand CpG-ODN werd toegevoegd, trad voornamelijk isotype verandering naar IgG1 op.\n\nHoofdstuk 5 bestudeerde B-cellen in zwangere MS pati\u00ebnten en gezonde controles als model van ziekte activiteit. Bij het vergelijken van B-cellen tijdens periodes van hoge ziekte activiteit (4-8 weken na bevalling) en lage ziekte activiteit (derde trimester van de zwangerschap) viel een verschil op tussen de chemokine receptoren die de geheugen B-cellen tot expressie brachten. Postpartum faciliteerden deze receptoren migratie naar het brein alsook lokalisatie in de lichte zone van de kiemcelcentrumreactie. Daarnaast vonden we dat B-cellen die verkregen waren van postpartum MS pati\u00ebnten makkelijker differentieerden tot plasmacellen in vitro in kweken die de aanwezigheid van folliculaire T-helpercellen nabootsen. Dit draagt mogelijk bij tot hun differentiatie tot mature cellen in het CZS.\n\nIn hoofdstuk 6 ontdekten we dat in onbehandelde pati\u00ebnten met NMOSD hoge percentages transitionele B-cellen aanwezig zijn in vergelijking met onbehandelde MS en MOGAD pati\u00ebnten en gezonde controles. Deze waren het meest uitgesproken aanwezig bij pati\u00ebnten die kort voor of na bloedafname een ziekteaanval kregen. Deze B-cel subset werd specifiek verlaagd in pati\u00ebnten die behandeld waren met stero\u00efden. In vitro ontstonden er in aanwezigheid van IFN-\u03b3 in kweken van alle pati\u00ebnten plasmablasten. Echter, alleen in pati\u00ebnten met een recente ziekteaanval werd het aantal plasmablasten verder verhoogd na toevoeging van een TLR9 ligand. In pati\u00ebnten met stabiele ziekte werd de plasmablast differentiatie hierdoor juist verminderd. In het supernatant van deze kweken van sommige NMOSD pati\u00ebnten met recidiverende ziekteaanvallen konden AQP4 specifieke antistoffen worden aangetoond. De aanwezigheid en ontwikkeling van na\u00efeve B-cellen in NMOSD pati\u00ebnten verschilt ten opzichte van controles en pati\u00ebnten met andere neuroimmunologische ziekten. Dit wordt be\u00efnvloed door corticostero\u00efden.\n\nIn hoofdstuk 7 werden de resultaten samengevat, de uitkomsten vergeleken en aanbevelingen gedaan voor toekomstig onderzoek.","summary":"Multiple sclerosis (MS), neuromyelitis optica spectrum disorders (NMOSD) and myelin oligodendrocyte glycoprotein (MOG) antibody disease (MOGAD) are demyelinating diseases of the central nervous system (CNS). Although these diseases differ in clinical features, an aberrant response of lymphocytes is thought to be driving the pathogenesis of all three disorders. In this thesis, specificity, local recruitment and development of lymphocyte subsets involved in the pathogenesis of these diseases have been studied.\n\nChapter 1 outlined the current state of knowledge of MS, NMOSD and MOGAD epidemiology and risk factors. The similarities and differences between diseases are discussed as are the different views on pathogenesis which have changed significantly over the years.\n\nIn Chapter 2, we studied the antigen specificity of cerebrospinal fluid (CSF) derived T cell lines in MS. As antigen-presenting cells, we used autologous B cells immortalized with EBV and transfected with a selection of MS-associated antigens (MSAg; contactin-2, inward rectifying potassium channel protein, myelin associated glycoprotein, myelin basic protein, myelin oligodendrocyte glycoprotein, neurofascin, proteolipid protein, protein S100B). This physiologically advantageous model was shown to be useful for triggering both antigen-specific CD4+ and CD8+ T cells. However, no significant responses were detected against the MSAg of choice.\n\nIn chapter 3, we found that a functionally distinct Th1-like Th17 subset termed Th17.1 was selectively associated with early disease activity in MS patients. This IFN-\u03b3 high GM-CSF high IL-17low CD4+ T cell subset was less present in the peripheral blood of patients who rapidly develop MS, enriched in MS CSF and brain tissues and highly capable of migrating across confluent human brain endothelial monolayers in vitro. Interestingly, in RRMS patients treated with natalizumab, only Th17.1 cells accumulated in the blood of clinical responders. This was not seen in non-responders, supporting the role of this brain-homing T-cell subset in inducing MS disease activity.\n\nRegarding B cells, we showed in Chapter 4 that IFN-\u03b3-related CXCR3+ populations were significantly enriched in MS CSF, meninges and brain compared to paired blood. The brain-infiltrating capacity of CXCR3+ B cells was underlined both in vitro and ex vivo using the same transmigration systems and blood samples from natalizumab-treated patients as in Chapter 3. During TFH-like cultures with naive B-cells IFN-\u03b3 mainly triggered plasmablast formation, while the addition of both IFN-\u03b3 and Toll like receptor (TLR) 9 ligand (CpG-ODN) resulted in switching to IgG1.\n\nChapter 5 addressed B-cell differentiation in pregnant MS patients and healthy controls in the context of relapse risk. When comparing B cells between the high relapse risk period (4-8 weeks after delivery) and low relapse risk period (third trimester of pregnancy), memory B cells showed an altered chemokine receptor expression profile related to increased migration into the CNS and preferential localization in the TFH cell-containing germinal center light zone. In addition, we found that postpartum memory B cells are more able to differentiate into plasma cells in a TFH-dependent manner in vitro, which may contribute to their final maturation in the CNS.\n\nIn Chapter 6 we observed high frequencies of transitional B cells in treatment naive patients with NMOSD compared to patients with MOGAD, MS and healthy controls. These high frequencies were most prominent in patient samples obtained close to relapse. Steroid treatment reduced proportions of transitional B cells in NMOSD, MOGAD and MS. In vitro, germinal center-like cultures containing IFN-\u03b3 induced plasmablast outgrowth. However, only in relapsing NMOSD and MOGAD patients, CpG-ODN synergized with IFN-\u03b3 to further enhance plasmablast outgrowth. In patients with stable disease, addition of CpG-ODN to culture medium reduced plasmablast proportions. AQP4 specific IgG could be found in the supernatant of patients with relapsing NMOSD. MOG specific IgG was not found. In conclusion, naive B cell homeostasis is altered in NMOSD and affected by corticosteroids.\n\nChapter 7 summarized results, compared outcomes between different studies and provided suggestions for future studies.","auteur":"Malou Janssen","auteur_slug":"malou-janssen","publicatiedatum":"18 mei 2021","taal":"EN","url_flipbook":"https:\/\/ebook.proefschriftmaken.nl\/ebook\/maloujanssen?iframe=true","url_download_pdf":"","url_epub":"","ordernummer":"FTP-202604070857","isbn":"978-94-6423-172-4","doi_nummer":"","naam_universiteit":"Erasmus Universiteit Rotterdam","afbeeldingen":13647,"naam_student:":"","binnenwerk":"","universiteit":"Erasmus Universiteit Rotterdam","cover":"","afwerking":"","cover_afwerking":"","design":""},"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/us_portfolio\/8863","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/us_portfolio"}],"about":[{"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/types\/us_portfolio"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/users\/8"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=8863"}],"version-history":[{"count":1,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/us_portfolio\/8863\/revisions"}],"predecessor-version":[{"id":8866,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/us_portfolio\/8863\/revisions\/8866"}],"wp:featuredmedia":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/media\/13647"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=8863"}],"wp:term":[{"taxonomy":"us_portfolio_category","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/us_portfolio_category?post=8863"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}