{"id":16151,"date":"2026-07-03T10:01:03","date_gmt":"2026-07-03T08:01:03","guid":{"rendered":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/portfolio\/pranav-mehta\/"},"modified":"2026-07-03T10:01:12","modified_gmt":"2026-07-03T08:01:12","slug":"pranav-mehta","status":"publish","type":"us_portfolio","link":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/portfolio\/pranav-mehta\/","title":{"rendered":"Pranav Mehta"},"content":{"rendered":"","protected":true},"excerpt":{"rendered":"","protected":true},"author":7,"featured_media":16152,"comment_status":"closed","ping_status":"closed","template":"","meta":{"_acf_changed":false,"footnotes":""},"us_portfolio_category":[45],"class_list":["post-16151","us_portfolio","type-us_portfolio","status-publish","post-password-required","hentry","us_portfolio_category-new-template"],"acf":{"naam_van_het_proefschift":"Conversations in the tumor microenvironment","samenvatting":"Dit proefschrift onderzoekt hoe CAFs tumorinvasie reguleren via geco\u00f6rdineerde mechanische, biochemische en ruimtelijke mechanismen. Met behulp van 3D in vitro modellen, time-lapse-beeldvorming en farmacologische verstoringen onthullen de bevindingen verschillende onderling verbonden principes die de paradigma\u2019s van stromale controle in de kankerbiologie herdefini\u00ebren.\n\nHoofdstuk 2 toont aan dat de ruimtelijke nabijheid van CAF en tumor een primaire bepalende factor is voor het begin en de organisatie van invasie. Deze observatie vult in vivo onderzoeken aan die aantonen dat de stromale architectuur en de fibroblastdistributie invasieve niches defini\u00ebren [1], [2]. Door CAF en tumorsfero\u00efden op gecontroleerde afstanden samen in te bedden, laten we zien dat CAFs collageen I remodelleren door middel van vezeluitlijning, compactie en spanningspropagatie \u2013 consistent met eerdere demonstraties van door fibroblasten gedreven ECM-contractiliteit [3], [4], [29], [30]. Deze afstandsafhankelijke ECM-remodellering vormt anisotrope vezelbanen die de collectieve migratie van kankercellen sturen, wat eerdere mechanobiologische bevindingen over ECM-anisotropie en migratiegeleiding ondersteunt [5], [13], [29]. Belangrijk is dat farmacologische remming van MMP\u2019s de collageenafbraak en de sfero\u00efde-expansie verminderde, maar de CAF-migratie of verspreiding op laag niveau niet teniet deed, wat overeenkomt met recent werk dat onderscheid maakt tussen \u201cmechanische remodellering\u201d en \u201cproteolytische remodellering\u201d [31]. Heterosfero\u00efde modellen bevestigden dat CAF\u2019s vergelijkbare ECM-dynamiek genereren, zelfs wanneer de ruimtelijke ordening verschilt, wat de robuustheid van matrixgerichte invasie aantoont.\n\nHoofdstuk 3 richt zich op methoden om EMT en de dynamische regulatie ervan door TGF-\u03b2-signalering te onderzoeken. EMT wordt nu erkend als een spectrum in plaats van een binaire schakelaar [32]. Met behulp van live-cell imaging schetsen we systematisch moleculaire en cellulaire technieken om TGF-\u03b2-ge\u00efnduceerde EMT te monitoren in normale en kankercellijnen. Het beschrijft hoe SMAD-activering, veranderingen in de expressie en lokalisatie van epitheliale en mesenchymale markers, veranderingen in celmorfologie en polariteit, dynamische reorganisatie van het actine-cytoskelet en stressvezels, evenals migratieassays kunnen worden beoordeeld. Samen bieden deze methoden een praktische toolbox voor het onderzoeken van EMT-dynamiek en epitheliale plasticiteit in vitro en zijn ze zeer geschikt om heterogene of metastabiele EMT-toestanden te onderzoeken die in recente literatuur worden beschreven [8].\n\nIn hoofdstuk vier vonden we dat geconditioneerde media van longfibroblasten de invasie van longadenocarcinoom-sfero\u00efden ondersteunen op een manier die afhankelijk is van TGF-\u03b2-receptorsignalering, maar in afwezigheid van detecteerbare TGF-\u03b2-ligand. Hoewel dit proefschrift de moleculaire basis van deze activering niet vaststelt, zijn de bevindingen consistent met bredere literatuur die suggereert dat de sterkte van receptorsignalering kan worden gevormd door de biochemische context van uitgescheiden factoren. Deze resultaten onderstrepen de mogelijkheid dat signalen afkomstig van fibroblasten signaalroutes kunnen versterken, zelfs wanneer liganden niet detecteerbaar zijn, wat een extra laag van stromale invloed op het gedrag van tumorcellen onthult.\n\nTot slot benadrukt het overzicht van microflu\u00efdische technieken een voortdurende verschuiving naar gemanipuleerde modellen die in staat zijn om ruimtelijke, temporele en mechanische controle uit te oefenen over tumor-stroma-interacties. De bevindingen in de hoofdstukken 2 tot en met 5 ondersteunen samen een ge\u00efntegreerd beeld waarin tumorinvasie voortkomt uit de wisselwerking tussen door CAF\u2019s aangedreven matrixmechanica, ECM-architectuur, EMT-plasticiteit en niet-canonische vormen van stromale signalering. Dit proefschrift toont aan dat CAF-mechanica, ECM-architectuur, EMT-dynamiek en paracriene signalering functioneren als een ge\u00efntegreerd regulerend systeem dat de invasiviteit van tumoren vormgeeft.","summary":"This thesis examines how CAFs regulate tumor invasion through coordinated mechanical, biochemical, and spatial mechanisms. Using 3D in vitro models, time\u2013lapse imaging, and pharmacologic perturbations, the findings reveal several interconnected principles that reshape stromal control paradigms in cancer biology.\n\nChapter 2 demonstrates that CAF \u2013 tumor spatial proximity is a primary determinant of invasion onset and organization. This observation complements in vivo studies showing that stromal architecture and fibroblast distribution define invasive niches[1], [2]. By co\u2013embedding CAF and tumor spheroids at controlled distances, we show that CAFs remodel collagen I through fiber alignment, compaction, and tension propagation, consistent with prior demonstrations of fibroblast driven ECM contractility [3], [4], [5], [6]. This distance dependent ECM remodeling forms anisotropic fiber tracks that direct collective cancer cell migration, supporting earlier mechanobiology findings on ECM anisotropy and migration guidance [4], [7], [8]. Importantly, pharmacologic inhibition of MMPs reduced collagen degradation and spheroid expansion but did not abolish CAF migration or low level dissemination, echoing recent work distinguishing \u201cmechanical remodeling\u201d from \u201cproteolytic remodeling\u201d [9]. Heterospheroid models confirmed that CAFs generate similar ECM dynamics even when spatial order differs, demonstrating the robustness of matrix directed invasion.\n\nChapter 3 focuses on methods to investigate EMT and its dynamic regulation by TGF\u2013\u03b2 signaling. EMT is now recognized as a spectrum rather than a binary switch[10]. Using live cell imaging, we systematically outline molecular and cellular techniques to monitor TGF\u2013\u03b2 induced EMT in normal and cancer cell lines. It describes how to assess SMAD activation, changes in epithelial and mesenchymal marker expression and localization, alterations in cell morphology and polarity, dynamic reorganization of the actin cytoskeleton and stress fibers, as well as migration assays. Together, these methods provide a practical toolbox for probing EMT dynamics and epithelial plasticity in vitro and are well suited to interrogate heterogeneous or metastable EMT states described in recent literature [11].\n\nIn chapter four we found that conditioned media of lung fibroblasts supports invasion of lung adenocarcinoma spheroids in a TGF\u2013\u03b2 receptor signaling dependent manner, but in the absence of detectable TGF\u2013\u03b2 ligand. While this thesis does not establish the molecular basis of this activation, the findings are consistent with broader literature suggesting that receptor signaling strength can be shaped by the biochemical context of secreted factors. These results underscore the possibility that fibroblast derived cues can potentiate signaling pathways even when ligands are not detectable, revealing an additional layer of stromal influence on tumor cell behavior.\n\nFinally, the microfluidic review highlights an ongoing shift toward engineered models capable of imposing spatial, temporal, and mechanical control over tumor \u2013 stroma interactions. Together, the findings across Chapters 2 \u2013 5 support an integrated view in which tumor invasion emerges from the interplay of CAF driven matrix mechanics, ECM architecture, EMT plasticity, and noncanonical modes of stromal signaling. Collectively, this thesis shows that CAF mechanics, ECM architecture, EMT dynamics, and paracrine signaling operate as an integrated regulatory system that shapes tumor invasiveness.","auteur":"Pranav Mehta","auteur_slug":"pranav-mehta","publicatiedatum":"4 september 2026","taal":"EN","url_flipbook":"https:\/\/ebook.proefschriftmaken.nl\/ebook\/pranavmehta?iframe=true","url_download_pdf":"https:\/\/ebook.proefschriftmaken.nl\/download\/d9a9a3be-3047-41bc-9995-be3200665a7a\/optimized","url_epub":"","ordernummer":"18464","isbn":"978-94-6534-452-2","doi_nummer":"","naam_universiteit":"Universiteit Leiden","afbeeldingen":16153,"naam_student:":"","binnenwerk":"","universiteit":"Universiteit Leiden","cover":"","afwerking":"","cover_afwerking":"","design":""},"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/us_portfolio\/16151","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/us_portfolio"}],"about":[{"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/types\/us_portfolio"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/users\/7"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=16151"}],"version-history":[{"count":1,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/us_portfolio\/16151\/revisions"}],"predecessor-version":[{"id":16154,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/us_portfolio\/16151\/revisions\/16154"}],"wp:featuredmedia":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/media\/16152"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=16151"}],"wp:term":[{"taxonomy":"us_portfolio_category","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/us_portfolio_category?post=16151"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}