{"id":15647,"date":"2026-06-01T08:20:32","date_gmt":"2026-06-01T08:20:32","guid":{"rendered":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/portfolio\/fleur-jansen\/"},"modified":"2026-06-01T08:20:44","modified_gmt":"2026-06-01T08:20:44","slug":"fleur-jansen","status":"publish","type":"us_portfolio","link":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/portfolio\/fleur-jansen\/","title":{"rendered":"Fleur Jansen"},"content":{"rendered":"","protected":true},"excerpt":{"rendered":"","protected":true},"author":7,"featured_media":15648,"comment_status":"closed","ping_status":"closed","template":"","meta":{"_acf_changed":false,"footnotes":""},"us_portfolio_category":[45],"class_list":["post-15647","us_portfolio","type-us_portfolio","status-publish","post-password-required","hentry","us_portfolio_category-new-template"],"acf":{"naam_van_het_proefschift":"In vitro insights into dietary advanced glycation end products and their impact on intestinal health","samenvatting":"Het bruiningsproces dat bereid voedsel zijn aantrekkelijke aroma's, smaken en texturen geeft, staat bekend als de Maillard-reactie. Deze niet-enzymatische reactie tussen eiwitten en suikers, ook wel eiwitglycatie genoemd, leidt tot de vorming van covalente adducten op lysine- en arginineresiduen; een heterogene groep verbindingen die gezamenlijk geavanceerde glycatie-eindproducten (AGE's) worden genoemd. Na de ontdekking van geglyceerd hemoglobine (HbA1c) als diagnostische marker voor diabetes in de jaren zestig, werd aangetoond dat endogene eiwitglycatie relevant is voor menselijke ziekten, wat vervolgens vragen opriep over de veiligheid van dieet-AGE's. Deze zorgen werden versterkt toen een hoge consumptie van bewerkte voedingsmiddelen in het westerse dieet in verband werd gebracht met een verhoogd risico op dezelfde niet-overdraagbare ziekten.\n\nAGE's uit de voeding komen het lichaam binnen via het spijsverteringskanaal. Na vertering worden ze voornamelijk geabsorbeerd als vrije AGE's of dipeptiden, en de huidige literatuur over de gezondheidseffecten van een hoge inname van AGE's richt zich daarom voornamelijk op de systemische effecten van deze biobeschikbare vormen. Echter, alleen eiwitgebonden AGE's zijn in staat om te binden aan de receptor voor AGE's (RAGE), die betrokken is bij ontstekingssignalering. In deze context zou de darm het primaire doelorgan zijn, aangezien het mogelijk het enige weefsel is dat onverteerde geglyceerde dieeteiwitten tegenkomt. Hun impact op intestinaal niveau blijft echter grotendeels onbekend. Toch is bekend dat de gezondheid van de darmen een sleutelrol speelt in het algemeen welzijn, dus deze interactie zou van invloed kunnen zijn op systemische gezondheidsuitkomsten. Daarom was het doel van dit proefschrift om ons begrip te vergroten van hoe intacte dieetgeglyceerde eiwitten de intestinale gezondheid be\u00efnvloeden op epitheel- en immuunniveau, met behulp van in vitro modellen.\n\nBelangrijkste bevindingen\nDe momenteel beschikbare in vitro studies naar de ontstekingsremmende effecten van geglyceerde dieeteiwitten op het darmepitheel kampen met meerdere methodologische beperkingen en moeten daarom met voorzichtigheid worden ge\u00efnterpreteerd (Hoofdstuk 2). Belangrijke punten van zorg zijn de beperkte chemische karakterisering van de geglyceerde monsters, waaronder onvoldoende endotoxinekwantificering, en de afwezigheid van geschikte positieve controles voor RAGE-activatie. De volgende hoofdstukken van dit proefschrift waren gericht op het aanpakken van deze onzekerheden. In Hoofdstuk 3 werd aangetoond dat zowel monomeren als aggregaten van onverteerde geglyceerde eiwitten (beta-lactoglobuline) een conventionele lucht-vloeistof interface monolaag doorkruisen, die het ileale villous epitheel nabootst, hoogstwaarschijnlijk via paracellulair transport. Deze bevinding daagt de heersende veronderstelling uit dat onverteerde geglyceerde eiwitten niet biobeschikbaar zijn, wat de mogelijkheid openlaat dat ze interageren met celtypen voorbij het epitheel, bijvoorbeeld intestinale immuuncellen. Aangezien wordt gedacht dat eiwitgebonden AGE's ontstekingen induceren via interactie met RAGE, werden deze geglyceerde eiwitten vervolgens getest op primaire immuuncellen in Hoofdstuk 4. Er kwamen enkele opmerkelijke waarnemingen naar voren. Ten eerste bleek RAGE voornamelijk intracellulair tot expressie te komen in meerdere celmodellen, terwijl RAGE alleen substantieel tot expressie kwam op het celoppervlak van specifieke in vitro modellen, bijvoorbeeld in M-CSF gedifferentieerde M0-macrofagen. Ten tweede verminderde LPS-scavenging de ontstekingsreacties die werden toegeschreven aan geglyceerde dieeteiwitten drastisch, ondanks het feit dat de endotoxineniveaus als verwaarloosbaar werden beschouwd op basis van gangbare kwantificeringsmethoden. Daarentegen verminderde een RAGE-antagonist deze reacties niet, wat suggereert dat LPS in dergelijke experimenten als verstorende factor kan fungeren. Bovendien induceerde stimulatie met bekende RAGE-agonisten (bijv. HMGB1 of A\u03b2-42) geen ontstekingsreactie, wat de vraag oproept of LPS zou kunnen fungeren als een noodzakelijke co-factor in RAGE-gemedieerde processen. Deze hypothese werd onderzocht in Hoofdstuk 5, maar de verkregen voorlopige resultaten waren gemengd. RAGE-agonisten versterkten de ontstekingspotentie van LPS niet in het eerder gebruikte primaire celmodel, maar incidentele amplificatie van NF-kB-activiteit werd waargenomen in NF-kB-reportercellen. Dit resultaat was echter niet consistent reproduceerbaar en ging niet gepaard met verhoogde productie van pro-inflammatoire cytokinen, zoals verwacht zou worden, wat suggereert dat er een alternatieve stroomafwaartse uitkomst bij betrokken kan zijn.\n\nDiscussie en conclusie\nOp basis van de belangrijkste bevindingen van dit proefschrift wordt voorgesteld dat een combinatie van stimuli nodig is om RAGE-afhankelijke ontstekingssignalering te induceren, wat suggereert dat geglyceerde dieeteiwitten alleen waarschijnlijk geen ontstekingen induceren bij gezonde individuen. Geplaatst in de bredere context van dieet-AGE-consumptie en de gevolgen daarvan voor de menselijke gezondheid, kan glycatie ook bijdragen aan lysinedefici\u00ebntie en van sommige geabsorbeerde vrije AGE's (met name HMGB1) wordt gesuggereerd dat ze nefrotoxische effecten hebben. Echter, zoals besproken in Hoofdstuk 6, lijken de gevolgen van een hoog-GI dieet en endogene AGE-vorming veel meer uitgesproken. Vanuit dit perspectief lijkt de maatschappelijke relevantie van verder dieet-AGE-onderzoek, met name bij gezonde populaties, beperkt.","summary":"The browning process that gives cooked foods their appealing aromas, flavors and textures is known as the Maillard reaction. This non-enzymatic reaction between proteins and sugars, also referred to as protein glycation, leads to the formation of covalent adducts on lysine and arginine residues; a heterogenous group of compounds collectively called advanced glycation end products (AGEs). Following the discovery of glycated hemoglobin (HbA1c) as a diagnostic marker for diabetes in the 1960s, endogenous protein glycation was shown to be relevant to human disease, which subsequently raised concerns about the safety of dietary AGEs. These concerns were reinforced when high consumption of processed foods in the Western diet became associated with an increased risk of the same non-communicable diseases. \n\nDietary AGEs enter the body through the digestive tract. After digestion, they are mainly absorbed as free AGEs or dipeptides, and current literature on the health effects of high AGE intake therefore predominantly focuses on the systemic effects of these bioavailable forms. However, only protein-bound AGEs are able to bind to the receptor for AGEs (RAGE), which is involved in inflammatory signaling. In this context, the intestine would be the primary target organ, as it might be the only tissue to encounter undigested glycated dietary proteins. However, their impact at the intestinal level remains largely unknown. Yet, intestinal health is known to play a key role in general wellbeing, so this interaction might be of influence to systemic health outcomes. Therefore, the aim of this thesis was to increase our understanding of how intact dietary glycated proteins affect intestinal health at the epithelium and immune level, using in vitro models. \n\nMain findings\nThe currently available in vitro studies on the inflammatory effects of glycated dietary proteins on the intestinal epithelium face multiple methodological limitations and should therefore be interpreted with caution (Chapter 2). Key concerns include the limited chemical characterization of the glycated samples, including insufficient endotoxin quantification, and the absence of appropriate positive controls for RAGE activation. The subsequent chapters of this thesis aimed to address these uncertainties. In Chapter 3, both monomers and aggregates of undigested glycated proteins (beta-lactoglobulin) were shown to cross a conventional air-liquid interface monolayer, mimicking the ileal villous epithelium, most likely via paracellular transport. This finding challenges the prevailing assumption that undigested glycated proteins are not bioavailable, leaving open the possibility that they might interact with cell types beyond the epithelium, for example intestinal immune cells. Since protein-bound AGEs are thought to induce inflammation through interaction with RAGE, these glycated proteins were subsequently tested on primary immune cells in Chapter 4. Some notable observations emerged. First, RAGE appeared predominantly expressed intracellularly across multiple cell models, while RAGE was only substantially expressed on the cell surface of specific in vitro models, for example in M-CSF differentiated M0 macrophages. Second, LPS scavenging drastically reduced the inflammatory responses attributed to glycated dietary proteins, despite endotoxin levels being considered neglectable based on common quantification methods. In contrast, a RAGE antagonist did not attenuate these responses, suggesting that LPS may act as a confounding factor in such experiments. Furthermore, stimulation with known RAGE agonists (e.g. HMGB1 or A\u03b2-42) did not induce an inflammatory response, raising the question whether LPS might function as a necessary co-factor in RAGE-mediated processes. This hypothesis was explored in Chapter 5, but the preliminary results obtained were mixed. RAGE agonists did not enhance the inflammatory potency of LPS in the primary cell model used previously, but occasional amplification of NF-kB activity was observed in NF-kB-reporter cells. This result was however not consistently reproducible and was not accompanied by increased pro-inflammatory cytokines production, as would be expected, suggesting that alternative downstream outcome may be involved. \n\nDiscussion and conclusion\nBased on the main findings of this thesis, it is proposed that a combination of stimuli is required to induce RAGE-dependent inflammatory signalling, suggesting that glycated dietary proteins alone are unlikely to induce inflammation in healthy individuals. When placed in the broader context of dietary AGE consumption and its implications for human health, glycation can also contribute to lysine deficiency and some absorbed free AGEs (particularly HMGB1) are suggested to exert nephrotoxic effects. However, as discussed in Chapter 6, the consequences of a high-GI diet and endogenous AGE formation appear to be far more pronounced. From this perspective, the societal relevance of further dietary AGE research, particularly in healthy populations, seems limited.","auteur":"Fleur Jansen","auteur_slug":"fleur-jansen","publicatiedatum":"9 juli 2026","taal":"EN","url_flipbook":"https:\/\/ebook.proefschriftmaken.nl\/ebook\/fleurjansen?iframe=true","url_download_pdf":"https:\/\/ebook.proefschriftmaken.nl\/download\/0daa82dc-cf82-4e36-bfb5-95584f39e256\/optimized","url_epub":"","ordernummer":"19056","isbn":"","doi_nummer":"","naam_universiteit":"Wageningen University","afbeeldingen":15649,"naam_student:":"","binnenwerk":"","universiteit":"Wageningen University","cover":"","afwerking":"","cover_afwerking":"","design":""},"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/us_portfolio\/15647","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/us_portfolio"}],"about":[{"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/types\/us_portfolio"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/users\/7"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=15647"}],"version-history":[{"count":1,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/us_portfolio\/15647\/revisions"}],"predecessor-version":[{"id":15650,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/us_portfolio\/15647\/revisions\/15650"}],"wp:featuredmedia":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/media\/15648"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=15647"}],"wp:term":[{"taxonomy":"us_portfolio_category","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/us_portfolio_category?post=15647"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}