{"id":15263,"date":"2026-05-19T14:53:08","date_gmt":"2026-05-19T14:53:08","guid":{"rendered":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/portfolio\/heiling-lu\/"},"modified":"2026-05-19T14:53:26","modified_gmt":"2026-05-19T14:53:26","slug":"heiling-lu","status":"publish","type":"us_portfolio","link":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/portfolio\/heiling-lu\/","title":{"rendered":"Heiling Lu"},"content":{"rendered":"","protected":true},"excerpt":{"rendered":"","protected":true},"author":7,"featured_media":15264,"comment_status":"closed","ping_status":"closed","template":"","meta":{"_acf_changed":false,"footnotes":""},"us_portfolio_category":[45],"class_list":["post-15263","us_portfolio","type-us_portfolio","status-publish","post-password-required","hentry","us_portfolio_category-new-template"],"acf":{"naam_van_het_proefschift":"Neuronal Diversity","samenvatting":"Dit waarborgt niet alleen de overleving en groei van Purkinjecellen, maar ook functionele calciumsignalering, wat een bevredigende synaptische connectiviteit bevestigt. Bij de geoptimaliseerde primaire Purkinje-celkweek werd gebruikgemaakt van een protocol met \u00e9\u00e9n medium, waarbij weefsel van 1 dag oude pups werd gebruikt. Hierdoor overleefden de Purkinje-cellen bijna 100%, was de AAV-transductie zeer effici\u00ebnt (ongeveer 99%) en werd ROR\u03b1 effectief door ASO uitgeschakeld, terwijl morfologische kenmerken behouden bleven en functionele calciumreacties werden omvat.\n\nHoofdstuk 3 concentreert zich op een bekende bestaande lacune in het cerebellumonderzoek, namelijk de beperkte kennis van de moleculaire signaturen die Purkinjecelsubpopulaties onderscheiden. Moleculaire profilering door middel van RNA-sequencing van individuele cellen identificeerde ongeveer 2900 differentieel tot expressie gebrachte genen (DEG\u2019s) in Purkinjecellen. Het onderzoek was gericht op het identificeren en karakteriseren van ruimtelijk-anatomische en moleculaire markers die Aldolase C-positieve van Aldolase C-negatieve Purkinjecelsubpopulaties onderscheiden. Het doel was te verduidelijken hoe veranderingen in genexpressie de structuur en daarmee de functie van Purkinjecellen be\u00efnvloeden. Deze studie onthulde de cruciale rol van specifieke genen, zoals RGS8 en SPRY3, bij de vorming van dendritische vertakkingen, een van de meest cruciale overwegingen voor optimale connectiviteit en prestaties van Purkinjecellen.\n\nIn hoofdstuk 4 verdiepte het onderzoek zich in de ontwikkelings- en functionele rollen van de transmembraanreceptor SorCS2 in het cerebellum, waarbij de effecten ervan op de fysiologie van Purkinjecellen, de algehele motorische functie en cerebellair-afhankelijk leren werden ge\u00ebvalueerd met behulp van globale SorCS2 knockout-muizen. De rol van SorCS2 was significant; globale SorCS2 knockout verhoogde de prikkelbaarheid van volwassen nodulaire Purkinjecellen, wat leidde tot een verbeterde leeradaptatie van de vestibulo-oculaire reflex (VOR) bij adolescenten, die wordt aangestuurd door het nodulaire cerebellum. Daarnaast verminderde het verworven leren van het oogknipperconditioneringsparadigma op volwassen leeftijd, wat de rol van SorCS2 in cognitie onderstreept.\n\nHoofdstuk 5 ten slotte beoogde het pre-ataxische proces van gebeurtenissen in een Spinocerebellaire Ataxie 1 (ATXN1[82Q]) muismodel in kaart te brengen om een temporele sequentie vast te stellen van de expressie van mutante eiwitten tot verschillende fysiologische, functionele en cognitieve tekorten. De pre-ataxische SCA1-cascade toonde aan dat mutante ATXN1[82Q]-expressie eerst de intrinsieke prikkelbaarheid verminderde tussen dag 10 en 14 na de geboorte, en vervolgens dendritische atrofie, verlies van klimvezels en verminderde oogknipperconditionering veroorzaakte, allemaal voordat klinische ataxie zich manifesteerde. Deze tijdlijn van pathologische veranderingen benadrukt het belang van vroege interventie en de mogelijkheid om biomarkers, zoals oogknipperconditionering, te identificeren die kunnen dienen als indicatoren voor preklinische stadia van ataxie. Al met al biedt het ge\u00efntegreerde werk in dit proefschrift een fundamenteel overzicht van de moleculaire diversiteit van Purkinje-cellen, onthult het vroege pathogene vensters voor therapeutische interventie in SCA1, valideert het eyeblink conditioning als een translationeel vroegdiagnostisch instrument en levert het een reproduceerbaar kweeksysteem op dat mechanistische studies, gentherapietests en geneesmiddelenscreening in het cerebellumonderzoek zal versnellen. Dit onderzoek vergroot niet alleen ons begrip van de cerebellumfunctie, maar stimuleert ook een bredere dialoog over het snijvlak van genetica, neurobiologie en therapeutische innovatie bij de aanpak van complexe neurologische aandoeningen.","summary":"This ensures not only the survival and growth of Purkinje cells but also functional calcium signaling, confirming satisfactory synaptic connectivity. The optimized primary Purkinje cell culture utilized a single-medium protocol using tissue from 1-day-old pups. As a result, Purkinje cell survival was nearly 100%, AAV transduction was highly efficient (approximately 99%), and ROR\u03b1 was effectively knocked out by ASO while morphological features were maintained and functional calcium responses were included.\n\nChapter 3 focuses on a known existing gap in cerebellar research, namely the limited knowledge of the molecular signatures that distinguish Purkinje cell subpopulations. Molecular profiling via single-cell RNA sequencing identified approximately 2,900 differentially expressed genes (DEGs) in Purkinje cells. The research aimed to identify and characterize spatial-anatomical and molecular markers that distinguish Aldolase C-positive from Aldolase C-negative Purkinje cell subpopulations. The goal was to clarify how changes in gene expression affect the structure and thus the function of Purkinje cells. This study revealed the crucial role of specific genes, such as RGS8 and SPRY3, in the formation of dendritic branching, one of the most critical considerations for optimal connectivity and performance of Purkinje cells.\n\nIn Chapter 4, the research delved into the developmental and functional roles of the transmembrane receptor SorCS2 in the cerebellum, evaluating its effects on Purkinje cell physiology, overall motor function, and cerebellum-dependent learning using global SorCS2 knockout mice. The role of SorCS2 was significant; global SorCS2 knockout increased the excitability of adult nodular Purkinje cells, leading to improved learning adaptation of the vestibulo-ocular reflex (VOR) in adolescents, which is controlled by the nodular cerebellum. Additionally, acquired learning in the eyeblink conditioning paradigm was reduced in adulthood, underlining the role of SorCS2 in cognition.\n\nFinally, Chapter 5 aimed to map the pre-ataxic process of events in a Spinocerebellar Ataxia 1 (ATXN1[82Q]) mouse model to establish a temporal sequence from the expression of mutant proteins to various physiological, functional, and cognitive deficits. The pre-ataxic SCA1 cascade showed that mutant ATXN1[82Q] expression first reduced intrinsic excitability between postnatal days 10 and 14, followed by dendritic atrophy, loss of climbing fibers, and impaired eyeblink conditioning, all before clinical ataxia manifested. This timeline of pathological changes emphasizes the importance of early intervention and the possibility of identifying biomarkers, such as eyeblink conditioning, that can serve as indicators for preclinical stages of ataxia. Overall, the integrated work in this thesis provides a fundamental overview of the molecular diversity of Purkinje cells, reveals early pathogenic windows for therapeutic intervention in SCA1, validates eyeblink conditioning as a translational early diagnostic tool, and provides a reproducible culture system that will accelerate mechanistic studies, gene therapy testing, and drug screening in cerebellar research. This research not only enhances our understanding of cerebellar function but also stimulates a broader dialogue on the intersection of genetics, neurobiology, and therapeutic innovation in addressing complex neurological disorders.","auteur":"Heiling Lu","auteur_slug":"heiling-lu","publicatiedatum":"1 juli 2026","taal":"NL","url_flipbook":"https:\/\/ebook.proefschriftmaken.nl\/ebook\/heilinglu?iframe=true","url_download_pdf":"https:\/\/ebook.proefschriftmaken.nl\/download\/15fe0707-e305-4965-80df-e15269a0c48a\/optimized","url_epub":"","ordernummer":"19042","isbn":"","doi_nummer":"","naam_universiteit":"Erasmus Universiteit Rotterdam","afbeeldingen":15265,"naam_student:":"","binnenwerk":"","universiteit":"Erasmus Universiteit Rotterdam","cover":"","afwerking":"","cover_afwerking":"","design":""},"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/us_portfolio\/15263","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/us_portfolio"}],"about":[{"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/types\/us_portfolio"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/users\/7"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=15263"}],"version-history":[{"count":1,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/us_portfolio\/15263\/revisions"}],"predecessor-version":[{"id":15266,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/us_portfolio\/15263\/revisions\/15266"}],"wp:featuredmedia":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/media\/15264"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=15263"}],"wp:term":[{"taxonomy":"us_portfolio_category","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/us_portfolio_category?post=15263"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}