{"id":14980,"date":"2026-05-07T08:21:38","date_gmt":"2026-05-07T08:21:38","guid":{"rendered":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/portfolio\/mariana-leal\/"},"modified":"2026-05-07T08:22:00","modified_gmt":"2026-05-07T08:22:00","slug":"mariana-leal","status":"publish","type":"us_portfolio","link":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/portfolio\/mariana-leal\/","title":{"rendered":"Mariana Leal"},"content":{"rendered":"","protected":true},"excerpt":{"rendered":"","protected":true},"author":7,"featured_media":14981,"comment_status":"closed","ping_status":"closed","template":"","meta":{"_acf_changed":false,"footnotes":""},"us_portfolio_category":[45],"class_list":["post-14980","us_portfolio","type-us_portfolio","status-publish","post-password-required","hentry","us_portfolio_category-new-template"],"acf":{"naam_van_het_proefschift":"Extracellular Vesicles in Cervical Cancer","samenvatting":"Hoewel HPV-vaccinatie de incidentie van baarmoederhalskanker aanzienlijk heeft verminderd, blijven effectieve therapeutische strategie\u00ebn noodzakelijk, met name in lage- en middeninkomenslanden. De progressie van baarmoederhalskanker beperkt zich niet tot de tumor micro-omgeving (TME), maar gaat gepaard met systemische immunologische veranderingen die samenhangen met een ongunstige prognose. Een toename van circulerende myelo\u00efde-afgeleide suppressorcellen (MDSCs) en een verhoogde neutrofiel-lymfocyt ratio worden consistent geassocieerd met een slechtere prognose, wat ondersteunt dat baarmoederhalskanker zich gedraagt als een systemische immunologische aandoening in plaats van een strikt lokale maligniteit.\n\nBinnen immunosuppressieve populaties zijn lage-dichtheid neutrofielen (LDNs), een subgroep van MDSCs, naar voren gekomen als potenti\u00eble bijdragers aan ziekteprogressie. In Hoofdstuk 2 tonen wij aan dat LDN\u2019s significant verhoogd zijn in perifere mononucleaire bloedcellen (PBMCs) van pati\u00ebnten met baarmoederhalskanker vergeleken met gezonde donoren. Deze cellen vertonen verhoogde niveaus van gefosforyleerd STAT3 (pSTAT3), en hun frequentie correleert met slechtere klinische uitkomsten. Functioneel remmen LDNs de activatie van T cellen, wat erop wijst dat zij actief bijdragen aan systemische immuunsuppressie.\n\nAangezien verhoogde STAT3-activatie niet alleen wordt waargenomen in LDNs, maar ook in tumorcellen en tumor-geassocieerde macrofagen, stelden wij de hypothese dat tumor-afgeleide factoren die de systemische circulatie bereiken deze effecten zouden kunnen medi\u00ebren. Extracellulaire vesikels (EVs), door een lipidedubbellaag omgeven deeltjes die door vrijwel alle celtypen worden uitgescheiden, zijn naar voren gekomen als centrale mediatoren van intercellulaire communicatie over lange afstand. Door het transport van eiwitten, lipiden, DNA en regulatoire RNA\u2019s die de oudercel weerspiegelen, kunnen EVs signaalroutes en cellulaire fenotypes in ontvangende cellen moduleren en zo bijdragen aan immuunregulatie en tumorprogressie.\n\nIn Hoofdstuk 3 onderzochten wij of EVs afkomstig van baarmoederhalskankercellen circulerende immuunpopulaties konden be\u00efnvloeden. Binnen PBMCs waren monocyten de primaire cellen die tumor-afgeleide EV\u2019s effici\u00ebnt internaliseerden. Hoewel EV-behandelde monocyten veranderingen vertoonden na LPS-stimulatie, werd een verhoogde expressie waargenomen van immuuntolerantie-geassocieerde markers zoals PD-L1 en CD206, evenals modulatie van IL-6-productie. Bovendien remden baarmoederhalskanker-EVs de proliferatie van T-cellen na PHA-stimulatie in totale PBMC-culturen. Er werd echter geen direct effect waargenomen in gezuiverde T-cellen, wat suggereert dat EV-gemedieerde suppressie intermediaire immuunpopulaties vereist. Deze bevindingen tonen aan dat tumor-afgeleide EVs bijdragen aan systemische immuunmodulatie, zowel direct als indirect.\n\nHoewel tumor-afgeleide EVs immuunsuppressie en ziekteprogressie bevorderen, bezitten EVs ook eigenschappen die hen tot een aantrekkelijk therapeutisch platform maken. Hun biologische compatibiliteit, intrinsieke targetingscapaciteit en vermogen om functionele lading te transporteren positioneren hen als veelbelovende hulpmiddelen voor geneesmiddelafgifte.\n\nIn Hoofdstuk 4 onderzochten wij macrofaag-afgeleide EVs als vehikels voor siRNA-gemedieerde STAT3-remming. Met THP-1-afgeleide macrofagen als EV-donoren karakteriseerden wij hun fenotypes en functionele eigenschappen. M1-afgeleide EVs induceerden een G1-celcyclusarrest in tumorcellen, wat leidde tot verminderde proliferatie. Daarnaast werden M1-EVs succesvol geladen met STAT3-gerichte siRNA en leverden zij functionele lading af aan HeLa-cellen, resulterend in verminderde STAT3-expressie.\n\nSamenvattend toont dit proefschrift de dubbele rol van EVs in baarmoederhalskanker: tumor-afgeleide EVs dragen bij aan systemische immuundysregulatie en ziekteprogressie, terwijl gemodificeerde EVs kunnen worden ingezet als therapeutische hulpmiddelen. Deze bevindingen verschaffen mechanistisch inzicht in de pathofysiologie van baarmoederhalskanker en ondersteunen de ontwikkeling van EV-gebaseerde therapeutische strategie\u00ebn.\n\nTrefwoorden: Extracellulaire vesikels, Baarmoederhalskanker, Macrofagen, M1-macrofagen, STAT3","summary":"Although HPV vaccination has significantly reduced the incidence of cervical cancer, effective therapeutic strategies remain necessary, particularly in low- and middle-income countries. Cervical cancer progression is not restricted to the tumor microenvironment (TME) but is accompanied by systemic immune alterations that correlate with poor clinical outcomes. Increased levels of circulating myeloid-derived suppressor cells (MDSCs) and elevated neutrophil-to-lymphocyte ratios are consistently associated with worse prognosis, supporting the concept that cervical cancer behaves as a systemic immunological disease rather than a strictly localized malignancy.\n\nAmong immunosuppressive populations, low-density neutrophils (LDNs), a subset of MDSCs, have emerged as potential contributors to disease progression. In Chapter 2, we demonstrated that LDNs are significantly expanded in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) from cervical cancer patients compared to healthy donors. These cells displayed increased levels of phosphorylated STAT3 (pSTAT3), and their frequency correlated with worse clinical outcomes. Functionally, LDNs inhibited T-cell activation, indicating that they actively contribute to systemic immune suppression.\n\nGiven that enhanced STAT3 activation is observed not only in LDNs but also in cervical cancer cells and tumor-associated macrophages, we hypothesized that tumor-derived factors capable of reaching systemic circulation could mediate these effects. Extracellular vesicles (EVs), lipid bilayer\u2013enclosed particles released by virtually all cell types, have emerged as central mediators of long-distance intercellular communication. By transporting proteins, lipids, DNA, and regulatory RNAs reflective of their parental cells, EVs can modulate signaling pathways and cellular phenotypes in recipient cells, thereby contributing to immune regulation and tumor progression.\n\nIn Chapter 3, we investigated whether cervical cancer\u2013derived EVs could influence circulating immune populations. Within PBMCs, monocytes were the primary cells capable of efficiently internalizing tumor-derived EVs. Although EV-treated monocytes did undergo classical polarization shifts following LPS stimulation, they exhibited increased expression of immune tolerance\u2013associated markers such as PD-L1 and CD206, along with modulation of IL-6 production. Importantly, cervical cancer EVs impaired T-cell proliferation following PHA stimulation in total PBMC cultures. However, no direct effect was observed in purified T cells, suggesting that EV-mediated suppression requires intermediary immune populations. These findings indicate that cervical cancer EVs contribute to systemic immune modulation both directly and indirectly.\n\nWhile tumor-derived EVs appear to promote immune suppression and disease progression, EVs also possess characteristics that make them attractive therapeutic platforms. Their biological compatibility, intrinsic targeting capacity, and ability to transport functional cargo position them as promising tools for drug delivery strategies.\n\nIn Chapter 4, we explored macrophage-derived EVs as vehicles for siRNA-mediated STAT3 inhibition. Using THP-1\u2013derived macrophage subsets as EV donors, we characterized their phenotypes and functional properties. M1-derived EVs induced G1 cell-cycle arrest in tumor cells, reducing proliferative capacity. Furthermore, M1 EVs were successfully loaded with STAT3-targeting siRNA and delivered functional cargo to HeLa cells, resulting in reduced STAT3 expression.\n\nOverall, this thesis reveals the dual nature of EVs in cervical cancer: tumor-derived EVs contribute to systemic immune dysregulation and disease progression, whereas engineered EVs can be harnessed as therapeutic tools. These findings provide mechanistic insight into cervical cancer pathophysiology and support the development of EV-based therapeutic strategies.\n\nKey words: Extracellular vesicles, Cervical cancer, Macrophages, M1macrophages, STAT3","auteur":"Mariana Leal","auteur_slug":"mariana-leal","publicatiedatum":"1 juni 2026","taal":"EN","url_flipbook":"https:\/\/ebook.proefschriftmaken.nl\/ebook\/marianaleal?iframe=true","url_download_pdf":"https:\/\/ebook.proefschriftmaken.nl\/download\/e1ef4e30-501d-4526-bba6-265beb2b6ee2\/optimized","url_epub":"","ordernummer":"19027","isbn":"","doi_nummer":"","naam_universiteit":"Rijksuniversiteit Groningen","afbeeldingen":14982,"naam_student:":"","binnenwerk":"","universiteit":"Rijksuniversiteit Groningen","cover":"","afwerking":"","cover_afwerking":"","design":""},"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/us_portfolio\/14980","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/us_portfolio"}],"about":[{"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/types\/us_portfolio"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/users\/7"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=14980"}],"version-history":[{"count":1,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/us_portfolio\/14980\/revisions"}],"predecessor-version":[{"id":14983,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/us_portfolio\/14980\/revisions\/14983"}],"wp:featuredmedia":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/media\/14981"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=14980"}],"wp:term":[{"taxonomy":"us_portfolio_category","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/us_portfolio_category?post=14980"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}