{"id":11820,"date":"2026-04-20T07:15:16","date_gmt":"2026-04-20T07:15:16","guid":{"rendered":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/portfolio\/rianne-bouma\/"},"modified":"2026-04-20T07:15:24","modified_gmt":"2026-04-20T07:15:24","slug":"rianne-bouma","status":"publish","type":"us_portfolio","link":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/portfolio\/rianne-bouma\/","title":{"rendered":"Rianne Bouma"},"content":{"rendered":"","protected":true},"excerpt":{"rendered":"","protected":true},"author":7,"featured_media":11821,"comment_status":"closed","ping_status":"closed","template":"","meta":{"_acf_changed":false,"footnotes":""},"us_portfolio_category":[45],"class_list":["post-11820","us_portfolio","type-us_portfolio","status-publish","post-password-required","hentry","us_portfolio_category-new-template"],"acf":{"naam_van_het_proefschift":"The A-Z of APCs","samenvatting":"Kanker ontwikkelt zich door een complex samenspel van factoren, zoals de opeenstapeling van oncogene mutaties, epigenetische en post-translationele modificaties en interacties met de extracellulaire matrix en het immuunsysteem. Ontwikkelende tumoren rekruteren gastheercellen en hervormen het vaatstelsel en de extracellulaire matrix, waarmee zij het tumor micromilieu vormgeven. Immuuncellen vormen een belangrijk onderdeel van het tumor micromilieu en de interacties tussen immuuncellen en de tumor kunnen zowel tumorgroei bevorderen als remmen. Tumoren kunnen worden ingedeeld op basis van de hoeveelheid immuuncellen die het tumorweefsel infiltreren; een tumor zonder immuuncel infiltratie of met uitgesloten immuuncellen wordt omschreven als een \u201ckoude\u201d tumor, terwijl een tumor met infiltratie van verschillende soorten immuuncellen een \u201cwarme\u201d tumor wordt genoemd.\n\nDe interactie tussen kankercellen en het immuunsysteem wordt beschreven als de \u201ccancer immunity\u201d cyclus. Immunogene celdood van kankercellen leidt tot de afgifte van antigenen en moleculen die het immuunsysteem stimuleren. Deze kunnen worden opgenomen door antigeen-presenterende cellen, zoals dendritische cellen. Deze dendritische cellen raken geactiveerd, migreren naar de lymfeklieren, presenteren daar het verkregen antigeen en activeren op die manier antigeen-specifieke T-cellen. Na activatie migreren deze T-cellen naar de tumor, treden uit de bloedbaan en herkennen en doden de kankercellen. De ontwikkelende tumor kan alle stappen van de cancer immunity cyclus verstoren. Verschillende therapie\u00ebn, zoals bijvoorbeeld checkpointremmers, zijn ontwikkeld om in te grijpen op de immuun-verstorende werking van de tumor. Therapeutische kankervaccins bevatten kanker-specifieke antigenen en worden gebruikt om antigeen-specifieke T-cellen activeren.\n\nOp dit moment zijn er meerdere therapeutische kankervaccins in ontwikkeling en deze bestaan uit verschillende combinaties van kanker-specifieke antigenen, immuun-stimulerende adjuvantia en een vaccinatie platform. De meeste kankervaccins zijn afhankelijk van niet-specifieke opname door dendritische cellen om een immuunrespons op te wekken, maar wij hebben eerder ontdekt dat specifieke binding van antigeen aan de CD169\/Siglec-1 receptor op macrofagen ervoor zorgt dat er meer antigeen-specifieke T-cellen gegenereerd worden. In dit proefschrift onderzochten we de binding van therapeutische kankervaccins aan verschillende receptoren op dendritische cellen en macrofagen (DEC-205, CLEC9A, DC-SIGN, en CD169) en hun vermogen om een anti-tumorimmuunrespons te versterken.\n\nAllereerst beschreven we de functie van CD169\u207a macrofagen in gezondheid en ziekte, en bespraken we deze cellen als doelwit voor vaccinatiestrategie\u00ebn in verschillende contexten (hoofdstuk 2). Vervolgens onderzochten we liposomen die CD169 of DC-SIGN kunnen binden door de toevoeging van natuurlijke liganden of nanobodies. We vergeleken de opgewekte immuunrespons na het binden van deze liposomen aan CD169 of DC-SIGN op het oppervlak van antigeen-presenterende cellen. We ontdekten dat antigeen-bevattende liposomen met nanobodies of natuurlijk ligand gericht tegen CD169 een verhoogde T-cel respons opwekten in vergelijking met niet-specifieke controle liposomen. Liposomen met nanobodies of natuurlijk liganden gericht tegen DC-SIGN induceerden geen verhoogde immuunrespons (hoofdstuk 3). In hoofdstuk 4 onderzochten we drie verschillende soorten liposomen met drie verschillende nanobodies gericht tegen CD169. Deze vergeleken we met liposomen met een nanobody gericht tegen CLEC9A. We zagen een hoge opname van de CD169- en CLEC9A-specifieke nanobody liposomen door cellijnen die deze receptoren op hun oppervlak hebben, en identificeerden verschillende CD169\u207a of CLEC9A\u207a celsubsets in menselijk bloed die de nanobody liposomen specifiek opnamen. E\u00e9n CD169-specifieke, antigeen-bevattende, nanobody liposoom zorgde voor verhoogde activatie van antigeen-specifieke T-cellen.\n\nNaast liposomen met nanobodies of natuurlijk liganden hebben we ook antilichamen onderzocht. We koppelden met behulp van Sortase A antigenen aan antilichamen die binden aan DEC-205 of CD169. Zowel model als neoantigenen konden succesvol worden gekoppeld aan deze antilichamen, wat resulteerde in verhoogde binding aan celsubsets met DEC-205 of CD169 op het oppervlak, en in verhoogde T-cel activatie in vivo (hoofdstuk 5).\n\nOm ons begrip van de opname en verwerking van antigeen door antigeen-presenterende cellen verder te vergroten, onderzochten we de intracellulaire route van nanobodies, antilichamen, en liposomen met nanobodies of natuurlijke liganden, welke allemaal gericht waren tegen CD169. We observeerden dat antilichamen en nanobodies lang op het celoppervlak gebonden bleven van een CD169\u207a monocyt cellijn, met een kleine hoeveelheid recycling naar de vroege endosomen. Liposomen met nanobodies of natuurlijke liganden gericht tegen CD169 werden juist snel ge\u00efnternaliseerd en concentreerden zich in de lysosomen, maar niet in virus-bevattende compartimenten (hoofdstuk 6).\n\nIn het beenmerg ontwikkelen dendritische cellen zich vanuit hematopoietische stamcellen tot verschillende subsets met unieke functies. De transcriptionele regulatie van dendritische cel ontwikkeling is al uitgebreid onderzocht, maar het effect van de epigenetische regulatoren is nog onbekend. In hoofdstuk 7 onderzochten we de ontwikkeling van dendritische cellen in de afwezigheid van epigenetische regulator DOT1L en ontdekten we veranderingen in de ontwikkeling van DC2s en pDCs. Knock-out van Dot1l leidde daarnaast tot een verhoogde inflammatoire status.\n\nTot slot bespraken we de bevindingen van dit proefschrift in het licht van andere ontwikkelingen in het kankervaccinatieveld en schetsten we de uitdagingen en belangrijke vervolgstappen om vaccins in de toekomst beter beschikbaar te maken voor pati\u00ebnten (hoofdstuk 8).","summary":"Cancers develop through a complex interplay of factors such as the accumulation of oncogenic mutations, epigenetic and posttranslational modifications, and interactions with the extracellular matrix and the immune system. Advancing cancers recruit host cells and remodel the vasculature and extracellular matrix, thereby shaping the tumor microenvironment. Immune cells are an important component of the tumor microenvironment and interactions of immune cells with the tumor can have pro- or anti-tumor effects. Tumors can be categorized based on the amount of immune cells infiltrated in the tumor; a tumor without immune cell infiltration or with immune cells excluded is described as a \u201ccold\u201d tumor, whereas a tumor with infiltration of a variety of immune cells is described as a \u201chot\u201d tumor.\n\nThe interactions between the cancer cells and the immune system is described as the cancer immunity cycle. Immunogenic cancer cell death releases antigens and immunostimulatory molecules that can be picked up by antigen-presenting cells (APCs) such as dendritic cells (DCs). These DCs become activated, migrate to the lymph nodes, and present the obtained antigen to prime antigen-specific T cells. After activation, the T cells traffic to the tumor, extravasate and recognize and kill cancer cells. The developing tumor actively dysregulates all stages of the cancer immunity cycle, impairing an effective immune response which benefits the tumor. Several therapies, such as immune checkpoint inhibitors, have been developed to intervene in the immune dysregulating actions exerted by the tumor. Therapeutic cancer vaccines incorporating cancer antigens can be applied to enhance priming of cancer antigen-specific T cells.\n\nSeveral cancer vaccines are under investigation and these consist of different combinations of cancer antigens, immunostimulatory adjuvants and vaccination platforms. Most cancer vaccines rely on nonspecific uptake by DCs in order to elicit an immune response, but our previous studies indicated that targeting antigen to CD169\/Siglec-1 on macrophages significantly enhanced T cell priming. In this thesis, we have investigated whether targeting of cancer vaccines to different receptors on DCs and macrophages (DEC-205, CLEC9A, DC-SIGN, and CD169) can enhance their ability to elicit an anti-tumor immune response.\n\nFirst, we outlined the function of CD169+ macrophages in health and disease and discussed their potential as targets for vaccination strategies in different settings (chapter 2). Next, we examined liposomes that bind to CD169 or DC-SIGN via the incorporation of natural ligands or nanobodies and compared the immune response after targeting these antigen-containing liposomes to CD169 or DC-SIGN-expressing APCs in vivo. Here, we discovered that CD169-specific nanobody and natural ligand liposomes elicit an increased T cell response compared to untargeted control liposomes, while DC-SIGN-specific nanobody or natural ligand liposomes did not induce an increased immune response (chapter 3). In chapter 4, we investigated three liposomes incorporating different CD169-specific nanobody clones and one CLEC9A-specific nanobody liposome. We observed high uptake of the CD169- and CLEC9A-specific nanobody liposomes by receptor-overexpressing cell lines and identified several CD169+ or CLEC9A+ cell subsets in human blood which specifically took up the nanobody liposomes. Interestingly, only one CD169-specific nanobody liposome elicited increased T cell activation.\n\nBesides liposomes as vaccination platform, we also investigated antibodies and successfully conjugated antigens to antibodies specific for DEC-205 or CD169 through proximity-based Sortase A-mediated ligation. Both model and neoantigens could successfully be attached to antibodies and these antibody-antigen vaccines were specifically taken up by DEC-205- or CD169-expressing cell subsets in vitro and in vivo, which led to increased T cell priming in vivo (chapter 5).\n\nTo increase our understanding of vaccine uptake and processing by CD169+ APCs, we explored the intracellular routing of CD169-binding nanobodies, antibodies, nanobody liposomes and natural ligand liposomes. We observed that antibodies and nanobodies are retained on the cell surface of a CD169-expressing monocytic cell line with some recycling to and from the early endosomes. In comparison, CD169 nanobody or natural ligand liposomes are internalized rapidly and accumulate in the lysosomes, but not the virus-containing compartments (chapter 6).\n\nIn the bone marrow, DCs develop from hematopoietic stem cells into different subsets with unique functions. While transcriptional regulation of DC development is well established, whether epigenetic mechanisms are involved is still unknown. In chapter 7 we investigated DC development in the absence of epigenetic regulator DOT1L and discovered changes in the development of DC2s and pDCs after Dot1l knock out in vitro or in vivo. In addition, Dot1l knock out resulted in an increased inflammatory status.\n\nFinally, we discussed the findings of this thesis in relation to other developments in the cancer vaccine field and outlined challenges and key steps to take to improve vaccine availability for patients in the future (chapter 8).","auteur":"Rianne Bouma","auteur_slug":"rianne-bouma","publicatiedatum":"19 mei 2026","taal":"EN","url_flipbook":"https:\/\/ebook.proefschriftmaken.nl\/ebook\/riannebouma?iframe=true","url_download_pdf":"https:\/\/ebook.proefschriftmaken.nl\/download\/0825530f-1da2-4490-b85b-955d944057cc\/optimized","url_epub":"","ordernummer":"18872","isbn":"","doi_nummer":"","naam_universiteit":"Vrije Universiteit Amsterdam","afbeeldingen":11822,"naam_student:":"","binnenwerk":"","universiteit":"Vrije Universiteit Amsterdam","cover":"","afwerking":"","cover_afwerking":"","design":""},"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/us_portfolio\/11820","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/us_portfolio"}],"about":[{"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/types\/us_portfolio"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/users\/7"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=11820"}],"version-history":[{"count":1,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/us_portfolio\/11820\/revisions"}],"predecessor-version":[{"id":11823,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/us_portfolio\/11820\/revisions\/11823"}],"wp:featuredmedia":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/media\/11821"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=11820"}],"wp:term":[{"taxonomy":"us_portfolio_category","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/us_portfolio_category?post=11820"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}