{"id":11766,"date":"2026-04-15T11:42:36","date_gmt":"2026-04-15T11:42:36","guid":{"rendered":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/portfolio\/aram-de-haas\/"},"modified":"2026-04-15T11:42:43","modified_gmt":"2026-04-15T11:42:43","slug":"aram-de-haas","status":"publish","type":"us_portfolio","link":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/portfolio\/aram-de-haas\/","title":{"rendered":"Aram de Haas"},"content":{"rendered":"","protected":true},"excerpt":{"rendered":"","protected":true},"author":7,"featured_media":11767,"comment_status":"closed","ping_status":"closed","template":"","meta":{"_acf_changed":false,"footnotes":""},"us_portfolio_category":[45],"class_list":["post-11766","us_portfolio","type-us_portfolio","status-publish","post-password-required","hentry","us_portfolio_category-new-template"],"acf":{"naam_van_het_proefschift":"Restoring the Immune Climate","samenvatting":"Immunotherapie tegen kanker heeft de afgelopen tien jaar grote vooruitgangen geboekt, maar veel pati\u00ebnten profiteren nog steeds niet vanwege onvoldoende activering van tumor specifieke immuunreacties. Dendritische cellen (DC\u2019s) spelen een essenti\u00eble rol in het starten van de adaptieve immuniteit, waardoor ze aantrekkelijke doelen zijn voor vaccinaties. Nanodeeltjesvaccins, in het bijzonder liposomen, zijn goed geschikt om antigenen, adjuvantia en bindings moleculen in \u00e9\u00e9n formulering te combineren. In deze thesis hebben we de focus gelegd op het binden van de C-type lectine receptor DC-SIGN, die op menselijke DC\u2019s en bepaalde macrofagen tot expressie komt, en het onderzoeken van het potentieel van deze receptor om de levering van antigenen en de activering van T-cellen te verbeteren via liposomale vaccins.\n\nIn Hoofdstuk 1 wordt de rol van DC\u2019s in anti-tumor immuniteit ge\u00efntroduceerd, waarbij hun centrale positie in het activeren van het adaptieve immuunsysteem wordt benadrukt. Er wordt uitgelegd waarom effici\u00ebnte DC-activatie essentieel is voor succesvolle vaccinatie en de voordelen van benaderingen gebaseerde op nanodeeltjes die antigenen, adjuvantia en bindings moleculen combineren.\n\nHoofdstuk 2 bespreekt drie C-type lectine receptoren in detail, en de mogelijkheid om als doel te functioneren voor vaccinaties die gericht zijn op DC\u2019s. Deze receptoren, zoals DC-SIGN, Langerin en MGL, herkennen specifieke suikers en spelen een rol in de opname van antigenen en de presentatie van antigenen aan T cellen. Dit hoofdstuk legt uit welke exogene en endogene liganden deze receptoren kunnen herkennen en hoe suiker-verpakte nanodeeltjes gebruikt kunnen worden om deze receptoren te gebruiken voor opname in DC en het activeren van een immuunrespons.\n\nIn Hoofdstuk 3 werden liposomale nanodeeltjes ontworpen die met Lewis Y (LeY) suikers ingepakt zijn om DC-SIGN te binden, met toevoeging van het adjuvant \u03b1-Galactosylceramide (\u03b1GC) en een synthetisch lang peptide (SLP). In vitro studies met humane DC\u2019s en T cellen toonden aan dat DC-SIGN-bindende liposomen effici\u00ebnt werden opgenomen door DC\u2019s, en dat \u03b1GC de activatie van invariant NKT (iNKT) cellen en CD8+ T cellen kon induceren. Deze resultaten toonden aan dat liposomale vaccins kunnen worden ontworpen om DC-binding te combineren met antigen- en adjuvant-levering, wat resulteert in een effectieve immuunstimulatie.\n\nHoofdstuk 4 onderzocht de effectiviteit van DC-gerichte liposomale vaccins in vivo in een muismodel waarin DC-SIGN tot expressie wordt gebracht onder controle van de CD11c-promoter (DC-SIGNCD11c). Vaccinatie induceerde antigen-specifieke immuunresponsen, maar de activatie van CD8+ T cellen was niet sterker bij DC-SIGN bindende vaccines vergeleken met niet-bindende controle-vaccins. Echter, in een therapeutische tumor proef bleek dat zowel bindende als niet-bindende formulaties vergelijkbare tumorcontrole hadden. Dit suggereert dat de verminderde activatie van T cellen na DC-SIGN-bindende vaccines in dit model niet noodzakelijkerwijs leidt tot slechtere tumorcontrole.\n\nDe DC-SIGNCD11c muis ge\u00efntroduceerd in Hoofdstuk 4 brengt DC-SIGN primair tot expressie op DC\u2019s, maar niet op macrofagen, wat laat zien dat dit model niet de volledige expressie repliceert van DC-SIGN zoals in mensen. Daarom hebben we een tweede muis model ge\u00efntroduceerd in Hoofdstuk 5, waarin DC-SIGN tot expressie komt onder zijn endogene promotor (DC-SIGNEDNO). Dit model gaf een meer fysiologische verdeling van DC-SIGN, voornamelijk op cDC2\u2019s, moDC\u2019s en macrofagen, en afwezigheid op cDC1\u2019s. We hebben dit model gebruikt om te laten zien dat subcutane toediening van DC-SIGN-bindende antigenen leidde tot effici\u00ebnte opname en antigeen presentatie, wat resulteerde in de activering van CD8+ T cellen. Dit terwijl intraveneuze levering minder effectief was. Deze resultaten laten zien dat zowel de receptor distributie als de route van vaccinatie toediening belangrijk zijn voor de uitkomst van de gerichte vaccinatie strategie.\n\nTen slotte worden in Hoofdstuk 6 de bredere implicaties van deze bevindingen besproken. We concludeerden dat, hoewel DC-SIGN-bindende formulaties de levering van antigenen kan verbeteren, de impact op de immunogeniciteit onder andere afhangt van de immunologische context van de cel waaraan het vaccine is gericht. Het hoofdstuk kijkt ook verder dan de wetenschappelijke resultaten. Het reflecteert op het belang van preventie in de gezondheidszorg en hoe levensstijl- en omgevingsfactoren, waaronder klimaatverandering, het kankerrisico be\u00efnvloeden. Ook wordt de verantwoordelijkheid van de wetenschappelijke gemeenschap besproken om duurzamere onderzoekpraktijken te omarmen om de ecologische voetafdruk van wetenschap te verkleinen.\n\nSamenvattend toont deze thesis aan dat liposomale vaccins die gericht zijn op DC SIGN met succes kunnen worden ontworpen om antigenlevering, adjuvansstimulatie en receptor-gemedieerde binding te integreren. Het werk toont aan dat, hoewel DC-SIGN-bindende formulaties de opname door relevante antigen-presenterende cellen verbetert, dit niet automatisch leidt tot sterkere T-celresponsen. Door in vitro experimenten te vergelijken met twee verschillende transgene muismodellen voor DC-SIGN biedt deze thesis nieuwe inzichten in hoe de context van het model de uitkomsten bepaalt en benadrukt het de waarde van endogene-promotormodellen bij het nabootsen van menselijke receptor-expressie. Deze bevindingen benadrukken ook dat receptor-bindende formulaties, zoals het binden van DC-SIGN, een waardevol hulpmiddel kan zijn het verbeteren van antigenlevering en immuun activatie. Echter, de impact op de immunogeniciteit hangt ook af van de gastheercel die de receptor tot expressie brengt, aangezien DC-SIGN-binding ook immuun tolerantie kan induceren, vooral wanneer het tot expressie komt op bepaalde subsets van DC\u2019s of macrofagen. Daarom is receptor-binding slechts een deel van de vaccinontwerp strategie, die ook factoren zoals antigene formulering, adjuvant selectie, fenotype van de cel waarnaar het vaccine gericht is en toedieningsmethode moet overwegen om de gewenste immuunrespons te bereiken. Tot slot benadrukt dit werk dat hoewel vooruitgangen in de immunotherapie veelbelovend therapeutisch potentieel bieden, ze moeten worden beschouwd binnen de bredere context van maatschappelijke en milieukwesties. Dit benadrukt het belang van zowel medische innovatie als preventieve benaderingen in de gezondheidszorg, evenals de noodzaak voor duurzamere wetenschap.","summary":"Cancer immunotherapy has greatly advanced over the past decade, yet many patients still do not benefit due to insufficient priming of tumor-specific immune responses. Dendritic cells (DCs) are essential for initiating adaptive immunity, making them promising targets for vaccination. Nanoparticle-based vaccines, particularly liposomes, are well suited to combine antigens, adjuvants, and targeting moieties in a single formulation. In this thesis, we focused on targeting the C-type lectin receptor DC-SIGN, which is expressed on human DCs and certain macrophage subsets, and investigated its potential to enhance antigen delivery and T-cell activation through liposomal vaccine formulations.\n\nChapter 1 introduces the role of DCs in anti-tumor immunity, highlighting their central position in activating adaptive immune responses. It discusses why efficient DC activation is essential for successful vaccination and provides the rationale for nanoparticle-based approaches that combine antigen, adjuvant, and targeting ligands within one formulation.\n\nChapter 2 reviews C-type lectin receptors, and the potential as targets for DC targeting vaccination. These receptors, including DC-SIGN, Langerin, and MGL, recognize specific glycan structures and mediate antigen uptake. The chapter outlines how glycan-decorated nanoparticles can be used to target these receptors to deliver antigens selectively to DC subsets, placing DC-SIGN targeting in the broader context of lectin-based vaccination strategies.\n\nIn Chapter 3, we designed liposomal nanoparticles functionalized with the Lewis Y (LeY) glycan to target DC-SIGN, and co-formulated them with the glycolipid adjuvant \u03b1-Galactosylceramide (\u03b1GC). In vitro studies using human DCs and T cells showed that DC-SIGN\u2013targeted liposomes were efficiently taken up and that the combination with \u03b1GC strongly enhanced invariant NKT (iNKT) cell activation and CD8+ T-cell activation. These results demonstrated that liposomal vaccines can be engineered to integrate DC targeting with adjuvant delivery, resulting in effective immune stimulation.\n\nIn Chapter 4, we evaluated the targeted liposomal vaccines in vivo using a human DC-SIGN transgenic mouse model in which expression is driven by the CD11c promoter (DC-SIGNCD11c). Vaccination induced detectable antigen-specific immune responses, but CD8+ T-cell activation was not consistently stronger after DC-SIGN targeting compared to untargeted controls.\n\nNevertheless, therapeutic tumor challenge experiments showed that targeted and untargeted formulations achieved similar tumor control, suggesting that enhanced uptake via DC-SIGN does not necessarily translate into superior T-cell immunity in this model.\n\nThe DC-SIGNCD11c mouse model used in Chapter 4 expresses DC-SIGN primarily on DC, but not on macrophages, indicating that this model does not fully represent the identical expression pattern of DC-SIGN as found in humans. For this reason we introduced a second transgenic mouse line in Chapter 5 in which human DC-SIGN is expressed under its endogenous promoter (DC-SIGNEDNO). This model provided a more physiological distribution of DC-SIGN, predominantly on cDC2s, moDCs, and macrophages, and absent from cDC1s. Using this model, we demonstrated that subcutaneous administration of DC-SIGN\u2013targeted antigens resulted in efficient uptake and presentation, leading to CD8+ T cell activation. In contrast, intravenous delivery was less effective. These findings highlight the importance of both receptor distribution and vaccination route in determining the outcome of targeted vaccination.\n\nFinally, in Chapter 6, we discussed the broader implications of these findings. We concluded that while DC-SIGN targeting can improve antigen delivery, its impact on immunogenicity depends on model context, antigen formulation, and adjuvant choice. The chapter also looks beyond scientific results. It reflects on the importance of prevention in healthcare, and on how lifestyle and environmental factors, including climate change, affect cancer risk. It also addresses the responsibility of the scientific community to adopt more sustainable research practices in order to reduce the environmental footprint of science.\n\nIn conclusion, this thesis shows that DC-SIGN\u2013targeted liposomal vaccines can be successfully designed to integrate antigen delivery, adjuvant stimulation, and receptor-mediated targeting. The work demonstrates that while DC-SIGN targeting improves uptake by relevant antigen-presenting cells, this does not automatically translate into stronger T-cell responses. By comparing in vitro assays with two different DC-SIGN transgenic mouse models, this thesis provides new insight into how model context determines outcomes and highlights the value of endogenous promoter models in capturing human-like receptor expression. These findings also emphasize that receptor targeting, such as targeting DC-SIGN, is a valuable tool for enhancing antigen delivery and immune activation. However, its impact on immunogenicity also depends on the host cell expressing the receptor, as DC-SIGN targeting can also induce immune tolerance, especially when expressed on certain subsets of DCs or macrophages. Therefore, receptor targeting is only one part of a comprehensive vaccine design strategy, which must also consider factors like antigen formulation, adjuvant selection, host cell phenotype, and delivery method to optimize the desired immune response. Finally, this work also highlights that while advances in immunotherapy offer promising therapeutic potential, they must be considered within the broader context of societal and environmental challenges, emphasizing the importance of both medical innovation and sustainable, preventive approaches to healthcare.","auteur":"Aram de Haas","auteur_slug":"aram-de-haas","publicatiedatum":"19 mei 2026","taal":"EN","url_flipbook":"https:\/\/ebook.proefschriftmaken.nl\/ebook\/aramdehaas?iframe=true","url_download_pdf":"https:\/\/ebook.proefschriftmaken.nl\/download\/ee95ab4c-4f9f-4ba6-8b16-5327ef976ee5\/optimized","url_epub":"","ordernummer":"18653","isbn":"","doi_nummer":"","naam_universiteit":"Vrije Universiteit Amsterdam","afbeeldingen":11768,"naam_student:":"","binnenwerk":"","universiteit":"Vrije Universiteit Amsterdam","cover":"","afwerking":"","cover_afwerking":"","design":""},"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/us_portfolio\/11766","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/us_portfolio"}],"about":[{"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/types\/us_portfolio"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/users\/7"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=11766"}],"version-history":[{"count":1,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/us_portfolio\/11766\/revisions"}],"predecessor-version":[{"id":11769,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/us_portfolio\/11766\/revisions\/11769"}],"wp:featuredmedia":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/media\/11767"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=11766"}],"wp:term":[{"taxonomy":"us_portfolio_category","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/us_portfolio_category?post=11766"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}