{"id":11738,"date":"2026-04-14T08:49:13","date_gmt":"2026-04-14T08:49:13","guid":{"rendered":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/portfolio\/wouter-muizelaar\/"},"modified":"2026-04-14T11:55:06","modified_gmt":"2026-04-14T11:55:06","slug":"wouter-muizelaar","status":"publish","type":"us_portfolio","link":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/portfolio\/wouter-muizelaar\/","title":{"rendered":"Wouter Muizelaar"},"content":{"rendered":"","protected":true},"excerpt":{"rendered":"","protected":true},"author":7,"featured_media":11739,"comment_status":"closed","ping_status":"closed","template":"","meta":{"_acf_changed":false,"footnotes":""},"us_portfolio_category":[45],"class_list":["post-11738","us_portfolio","type-us_portfolio","status-publish","post-password-required","hentry","us_portfolio_category-new-template"],"acf":{"naam_van_het_proefschift":"Seaweeds \u2013 Cows \u2013 Methane","samenvatting":"De rol van de veehouderij in de huidige wereld voedselproductie wordt heroverwogen vanwege de hieraan gekoppelde broeikasgasuitstoot. Methaan (CH4) is in herkauwers een van de eindproducten van de fermentatie van voed in de pens. Een groot deel van dit gas wordt via de neus en mond weer afgegeven aan de omgeving, dit wordt ook wel enterische emissie genoemd. De enterische CH4 emissie van herkauwers vormt een belangrijk deel van alle broeikasgas emissies afkomstig uit de veehouderij. Er zijn al meerdere strategie\u00ebn ontwikkeld om deze uitstoot te verminderen. Veelal zijn deze strategie\u00ebn gericht op het aanpassen van de rantsoensamenstelling of het toevoegen van specifieke additieven aan het rantsoen, om de CH4 uitstoot te verlagen. Zeewier, ook bekend als macroalgen, worden vanwege hun diverse chemische samenstelling beschouwd als een CH4 reducerend ingredi\u00ebnt. Het gebruik van zeewier in diervoeding is niet nieuw, maar het gebruik als CH4 reducerend ingredi\u00ebnt is een relatief recente ontwikkeling. In de ontwikkeling van nieuwe ingredi\u00ebnten met een bepaald doel speelt de balans tussen veiligheid en effectiviteit een centrale rol. In dit geval, het maximaliseren van de CH4 reductie zonder ongewenste effecten op diergezondheid en voedselveiligheid. Alhoewel zeewier potentie heeft om CH4 te reduceren, vormen de actieve componenten en andere stoffen die in zeewier accumuleren een risico voor de diergezondheid en voedselveiligheid wanneer deze worden gevoerd.\n\nHet algemene doel van deze thesis was om via twee onderzoekslijnen te bestuderen hoe zeewier kan bijdragen aan het reduceren van de enterische CH4 uitstoot van koeien. Deze onderzoekslijnen verschilden in welke zeewier soorten werden gebruikt, wat resulteerde in onderzoek met een focus op \u00f3f effectiviteit \u00f3f veiligheid van de specifieke zeewier soorten. In de eerste onderzoekslijn werden zeewieren uit noord west Europa onderzocht op hun CH4 reducerende potentie, als ook het effect op de productie kenmerken en microbioom samenstelling in de pens. De tweede onderzoekslijn richtte zich op zeewiersoorten behorend tot de genus Asparagopsis. De data uit de tweede onderzoekslijn zijn belangrijk voor het bepalen van veiligheidsgrenzen, met name rondom de absorptie, metabolisme, excretie en dynamiek van het actieve component bromoform (CHBr3). Ook werd de CH4 reducerende effectiviteit van synthetisch gevormd CHBr3 onderzocht.\n\nOp basis van zeewier specifieke koolhydraten en tannine-achtige componenten werd de hypothese gesteld dat het voeren van bepaalde zeewier soorten aan melk koeien de enterische CH4 emissie kon verlagen (Hoofdstuk 2). Bruine zeewieren (Phaeophyta) zijn van nature rijk aan florotannine, welke in vitro over CH4 reducerende capaciteiten beschikken. Rode zeewieren (Rhodophyta) zijn vaak rijk aan gesulfateerde koolhydraten zoals carrageen, welke CH4 kunnen reduceren door \u00f3f H2 af te vangen \u00f3f door de bacteri\u00eble fermentatie te be\u00efnvloeden. Het doel van de studie was om te bepalen wat het effect van Chondrus crispus (Rhodophyta), Saccharina latissima (Phaeophyta), en een 50\/50 mix van Fucus serratus (Phaeophyta) en S. latissima, 3 noord west Europese zeewieren, op de enterische gas emissies en productie kenmerken zijn in vergelijking met een controle dieet zonder zeewier. Per behandeling ontvingen 16 Holstein-Friesian koeien \u00f3f het controle dieet, of een van de drie di\u00ebten met zeewier voor 10 weken. Geen van de zeewier behandelingen had een effect op de enterische gas emissies. Wanneer koeien S. latissima ontvingen steeg de melk productie, FPCM productie, melk lactosegehalte en lactoseopbrengst, en daalde de melk eiwitgehalte ten opzichte van de controle. Het hoge arseen gehalte van het zeewier limiteerde de inclusie percentage, wat waarschijnlijk leidde tot te lage concentraties van de gehypothetiseerde actieve componenten. Deze limitatie benadrukt het belang van gespecialiseerde verwerking om de actieve componenten te concentreren, en ongewenste stoffen te scheiden.\n\nHet effect van het voeren van de 3 verschillende noord west Europese zeewieren (zie Hoofdstuk 2) op de pens microbioom diversiteit, samenstelling en aanwezigheid werd onderzocht met behulp van 16S rRNA metagenomische sequentiebepaling (Hoofdstuk 3). De hypothese was dat het voeren van zeewier, welke verschillend waren in structuur en samenstelling van terrestrische planten, de dierlijke productie kenmerken zouden verschillen door veranderingen in de pens microbioom. Per behandeling werden 8 koeien willekeurig geselecteerd, en opeenvolgend werd van deze koeien meermaals penssap verzameld na introductie van de behandelingen door middel van een orale maagsonde. Geen van de zeewierbehandelingen hadden een andere microbioom samenstelling in vergelijking met het controle dieet. Opmerkelijk genoeg was de Bray-Curtis ongelijkheidsafstand voor bacteri\u00ebn groter in alle zeewier behandelingen. In de zeewierbehandelingen werden enkele kern pens microben ge\u00efdentificeerd met een divers fibrolytische en metabolische capaciteiten, wat mogelijk bijdraagt aan het afbreken van zeewier specifieke koolhydraten. Door het combineren van alle behandelingen werd een hoger Firmicutes\/Bacteroidetes ratio gecorreleerd aan een lagere melk productie en verhoogde melk eiwit- en vetgehalte. In overeenstemming met de beperkte effecten op de productie en emissie factoren, werden er geen grote veranderingen in het pens microbioom, diversiteit, samenstelling en aanwezigheid geobserveerd.\n\nDe zeewieren Asparagopsis taxiformis and Asparagopsis armata inhiberen zeer effectief de CH4 productie zowel in vitro als in vivo vanwege hun hoge CHBr3 concentratie. Echter, door het voeren van deze zeewier kan de drogestof opname (DSO) van koeien verminderen en mogelijk overdracht plaatsvinden van CHBr3 naar dierlijke producten. Om de overdracht van CHBr3 naar dierlijke producten en het effect op dierlijke gezondheid en voedselveiligheid te onderzoeken, werden 12 Holstein-Friesian melk koeien maximaal 22 dagen gevoerd met A. taxiformis op verschillende inclusie niveaus (Hoofdstuk 4). De behandelingen laag, medium en hoog ontvingen respectievelijk 67, 133 en 333 g drogestof (DS) A. taxiformis per dag, wat neerkomt op 84,4, 167,6 en 419,6 mg CHBr3 per dag (1,26 mg CHBr3\/g DS A. taxiformis). Twee koeien met een consistent hoge zeewier opname uit de lage behandeling werden ge\u00ebuthanaseerd voor orgaanweefsel monstername. Vanwege slechte zeewier opname, en daardoor verslechterde DSO, werd het experiment op dag 22 vroegtijdig stopgezet, in overeenstemming met de experimentele protocollen. Gedurende het experiment werd de behandeling van specifieke dieren uit alle behandeling gestopt vanwege verminderde DSO, en een koe uit de medium behandeling werd ge\u00ebuthanaseerd op beslissing van de dierenarts. Op dag 1 en 10 werden meetbare CHBr3 concentraties gevonden in melk of urine van alle behandelingen, maar niet in de mest. De CHBr3 concentratie was onder de detectiegrens op dag 17 in melk, mest en urine, en in alle orgaanweefsel monsters op het einde van het experiment. Uit histologisch onderzoek van de penswand werden enkele ontstekingen van de pens papillen aangetroffen. Het kan niet worden uitgesloten of deze ontstekingen zijn ontstaan door omstandigheden die niet gelinkt zijn aan het voeren van A. taxiformis. Deze resultaten benadrukken de delicate balans tussen veiligheid en effectiviteit, en de noodzaak om beter te begrijpen wat er met CHBr3 gebeurt wanner het aan koeien wordt gevoerd.\n\nOp basis van de resultaten uit hoofdstuk 4 werd gehypothetiseerd dat CHBr3 kon worden gemetaboliseerd in de pens, of in organen zoals de lever. Om de temporele dynamiek van CHBr3 dehalogenatie van A. taxiformis en de effecten daarvan op de fermentatiekenmerken en microbi\u00eble samenstelling te onderzoeken, werd een in vitro batchfermentatie experiment uitgevoerd (Hoofdstuk 5). Substraat met of zonder A. taxiformis (Asparagopsis en Controle, respectievelijk) werden ge\u00efncubeerd. Cumulatieve gas productie was niet verschillend door toevoeging van A. taxiformis, terwijl de cumulatieve CH4 productie bijna volledig was onderdrukt. Totale vluchtige vetzuur (VVZ) concentratie en de molaire verhouding van propionaat waren niet verschillend tussen de Asparagopsis en Controle behandelingen, terwijl de molaire proportie van acetaat lager was in de Asparagopsis behandeling. Na 1 uur fermentatie was alleen een fractie van het toegevoegde CHBr3 detecteerbaar, en was onder het detectielimiet na 8 uur. De concentratie van dibroommethaan (CH2Br2) was aanzienlijk toegenomen binnen 1 uur fermentatie, en bleef relatief stabiel tot 72 uur fermentatie. Broom methaan (CH3Br) werd niet gedetecteerd. Het ontbreken van stoichiometrische omzetting van CHBr3 naar CH2Br2 suggereert dat er mogelijk aanvullende, niet ge\u00efdentificeerde ge bromeerde metabolieten zijn gevormd. Totaal broom, jodium en arseen concentraties bleven relatief stabiel over tijd. Het toevoegen van A. taxiformis resulteert in grote verschuivingen in de microbi\u00eble samenstelling in vitro, waaronder een lagere relatieve aanwezigheid van archaea- en ciliaatsoorten. De verschuivingen in de bacteri\u00eble samenstellingen weerspiegelen voornamelijk een adaptatie aan hogere H2 concentraties of alternatieve fermentatieprocessen. Concluderend, in vitro wordt CHBr3 afkomstig uit A. taxiformis snel gemetaboliseerd tot CH2Br2, verlaagt het de CH4 productie en heeft het een grote impact op de microbi\u00eble samenstelling.\n\nIn hoofdstukken 4 en 5 kan er geen onderscheid worden gemaakt welke effecten toege schreven kunnen worden aan het Asparagopsis zeewier, en welke aan het actieve component CHBr3. Om het effect van CHBr3 te scheiden van het zeewier werd synthetisch CHBr3 ge\u00efnfuseerd in de pens (Hoofdstuk 6). De effecten op DSO, enterisch CH4 en H2 productie, en de temporale dynamiek van deze gassen tijdens en na infuseren werden onderzocht. Vier niet lacterende, niet zwangere, pens gefistuleerde Holstein-Friesian koeien werden wil lekeurig aan 1 van de 4 behandelingen toegewezen in een 4 \u00d7 4 Latijns vierkant. In totaal bestonden de behandelingen uit 0 (CNTL), 59 (LAAG), 192 (MED), of 592 (HOOG) mg CHBr3 per dag, toegediend als een waterige oplossing via de pensfistel. Terwijl de response in DSO niet significant veranderde met een toenemende CHBr3 dosering, werd er wel een biologisch relevante reductie van 37% in DSO geobserveerd in de HOOG behandeling in vergelijking met de CNTL. Zowel CH4 productie (g\/d), als ook CH4 opbrengst (g\/ kg DSO) namen kwadratisch af, en H2 productie en H2 opbrengst namen kwadratisch toe met een toenemende CHBr3 dosering. Totale VVZ concentraties veranderde niet significant met toenemende CHBr3 dosering. De molaire verhoudingen van propionaat, butyraat, valeraat en vertakte VVZ namen kwadratisch toe, terwijl de molaire verhouding van acetaat kwadratisch afnam met een toenemende CHBr3 dosering. De HOOG behandeling in de 3de periode werd vroegtijdig stopgezet vanwege een verminderde voeropname, wat mogelijk resulteerde in een verminderde statistische power om verschillen aan te tonen voor DSO en VVZ. Door het toepassen van afzonderlijke logistische functies met vierparameters om de respons in CH4 en H2 productie van de HOOG behandeling tijdens en na infuseren te modelleren, werden vertraagde reacties van beide gassen zichtbaar. De afname in CH4 en toename in H2 productie leek te stabiliseren na 2-3 dagen. Na het stopzetten van de CHBr3 infusies leek de toename in CH4 en afname in H2 productie te stabiliseren na 4-5 dagen. Samenvattend wijst de toenemende dosis van synthetisch CHBr3 op een wisselwerking tussen effectiviteit en inname, en een vertraagde reactie in enterische gas emissies bij de hoogste dosering.\n\nIn Hoofdstuk 7 worden de resultaten van beide onderzoekslijnen, hoe zeewieren een bijdrage kunnen leveren aan het reduceren van de CH4 emissies, bediscussieerd en in een bredere context geplaatst. Meerdere factoren beperken het gebruik van de meeste zeewier soorten als CH4 remmer. De belangrijkste factoren houden verband met de accumulatie van mineralen en zware metalen in de zeewieren, of de te lage concentraties aan mogelijke actieve stoffen. Door optimalisatie van de cultivatie en verwerkingstechnieken kunnen de concentraties van ongewenste stoffen verlaagd worden, als ook de concentratie aan actieve componenten verhoogd worden of zelfs ge\u00ebxtraheerd uit het zeewier. Hierdoor zal de poten tie van zeewieren als CH4 remmers toenemen, maar het ontwikkelen van deze technieken kost tijd en financi\u00eble middelen. De zeewieren in de Asparagopsis genus beschikken over een hoge concentratie aan actieve componenten (gehalogeneerde metabolieten; zoals CHBr3) welke effectief de CH4 productie remmen, en verschillende ontwikkelingen in de cultivatie en verwerkingstechnieken hebben tot commerci\u00eble applicaties geleid. Een voorbeeld van een commerci\u00eble toepassing is de goedkope methode om het Asparagopsis spp. zeewier in olie onder te dompelen en daarmee de actieve componenten te extraheren. Na filtratie bevat het eindproduct lagere concentraties aan mineralen en zware metalen dan het zeewier. Er zijn echter nadelige effecten op de diergezondheid en voedselveiligheid in verband gebracht met het gebruik van Asparagopsis spp. als CH4 remmer. Ook is er te weinig informatie beschik baar voor de relevante autoriteiten om het gebruik van deze zeewier gebaseerde producten te beoordelen. Uit meerdere onderzoeken is bijvoorbeeld gebleken dat CHBr3 wordt overgedragen naar bloed, melk en urine, inclusief de metabolisatie van CHBr3 naar CH2Br2 en mogelijk andere onbekende broomhoudende metabolieten. Ook wordt het gebruik van Asparagopsis spp. of CHBr3 houdende producten in verband gebracht met verminderde DSO en potenti\u00eble penswand beschadigingen. Om de kwaliteit, zuiverheid en dosering te controleren en zo mogelijke bijwerkingen te voorkomen, zou synthetisch CHBr3 een alter natief kunnen zijn voor producten op basis van Asparagopsis. Echter, zelfs het gebruik van synthetisch CHBr3 wordt in verband gebracht met verminderde DSO, wat aantoont dat de actieve stof een belangrijke rol speelt bij dit nadelige effect. De onderliggende oorzaken van deze bijwerkingen zijn onbekend, en er worden verschillende hypothesen onderzocht die nader onderzoek vereisen. Over het algemeen kan verwacht worden dat in de praktijk lagere concentraties CHBr3 worden gebruikt in vergelijking met onderzoek, wat zal resulteren in lagere CH4 reducties.","summary":"The central role of livestock production in the current food system is globally reassessed due to its contribution to greenhouse gas (GHG) emissions. In ruminants, one of the end products of fermented feed in the rumen is methane (CH4), which is released via the mouth and nostrils (enteric emissions). This enteric CH4 emission from ruminants is a major contributor to all animal production related GHG emissions. Several strategies have been developed to reduce the amount of enteric CH4 emissions from ruminants, with many strategies focusing on diet composition and addition of specific ingredients that lower CH4 production. Seaweeds, also called macroalgae, are considered as CH4 reducing ingredients due to their diverse chemical composition. While seaweeds are no longer a novel ingredient in animal production, their application for reducing enteric CH4 emissions is relatively recent. In the development of novel ingredients for specific purposes, there is a balance between safety and efficacy. In this case, maximizing the CH4 reduction with no adverse effects on animal health and food safety. While seaweeds have potential to reduce enteric CH4 emissions, the active compounds and other compounds that seaweeds tend to accumulate pose a risk for animal health and food safety when fed.\n\nThe general objective of this thesis was to study how seaweeds can contribute to reducing enteric CH4 emissions of cattle through two research lines. These lines differentiated between the seaweed species used, resulting in a research focus on either efficacy or safety. The first research line used seaweed species originating from northwest Europe, and evaluated their efficacy in CH4 mitigation, as well as their effects on production characteristics and the rumen microbiome. The second research line used seaweed species belonging to the genus Asparagopsis, which were investigated to generate data relevant for establishing safety limits, particularly as to the absorption, metabolism, excretion and dynamics of the active compound bromoform (CHBr3). Additionally, the CH4 mitigating effectiveness of synthetic CHBr3 was evaluated.\n\nBased on seaweed specific carbohydrate and tannin-like composition, it was hypothesized seaweeds could reduce enteric CH4 emissions in vivo when fed to dairy cattle (Chapter 2). Brown seaweeds (Phaeophyta) are usually rich in phlorotannins, which have shown in vitro the ability to inhibit CH4 production. Red seaweeds (Rhodophyta) are usually rich in sulphated carbohydrates like carrageenan, which might affect CH4 production by sulphate acting as a H2 sink or the carbohydrate structure affecting bacterial fermentation. The objective of the present study was to determine the effect of Chondrus crispus (Rhodophyta), Saccharina latissima (Phaeophyta), and a 50\/50 mixture of Fucus serratus (Phaeophyta) and S. latissima, 3 common northwest European seaweeds, on enteric gas production and lactational performance of dairy cattle compared to a control diet without seaweed. Per treatment, 16 Holstein-Friesian cows were fed either the control diet, or one of the three seaweed diets for 10 weeks. None of the seaweed treatments affected enteric gas emissions. When fed S. latissima milk yield, FPCM yield, milk lactose content, and lactose yield increased, and milk protein content decreased compared to the control. The inclusion rate of the seaweed treatments was limited by their arsenic content, resulting in potentially too low concentrations of any of the hypothesized active compounds. Highlighting the need for more active compound oriented processing.\n\nThe dietary impact of feeding 3 common northwest European seaweeds (see Chapter 2) on rumen microbiome diversity, composition and abundance was evaluated by 16S rRNA metagenomic sequencing (Chapter 3). It was hypothesized that feeding seaweeds, which differ in structure and composition from terrestrial plants, would affect animal production characteristics by changing the rumen microbiome. Eight cows were randomly selected from each treatment group, and subsequently rumen fluid was collected from these animals using the oral stomach tubing method at various days after introduction of the treatments. None of the seaweed treatments resulted in a separate rumen microbiome composition compared to the control diet. However, all seaweed treatments resulted in a larger Bray-Curtis dissimilarity distance for bacteria. In the seaweed treatments, several core members of the rumen microbiome were identified which specifically are recognized for their diverse fybrolytic and metabolic capabilities, which could assist in seaweed carbohydrate breakdown. When combining all treatments, a higher Firmicutes\/Bacteroidetes ratio was correlated with reduced milk yield and increased protein and fat content in the milk. In line with the limited effects on production and emissions characteristics, no major changes in the rumen microbiome diversity, composition or abundance was observed.\n\nThe seaweeds Asparagopsis taxiformis and Asparagopsis armata effectively reduce CH4 emissions both in vitro and in vivo due to their high CHBr3 content. However, feeding these seaweeds might result in transfer of CHBr3 to animal products and reduced DMI. To investigate the transfer of CHBr3 to different animal matrices and effects on animal health and food safety, 12 Holstein-Friesian dairy cows were fed A. taxiformis at different inclusion levels for maximally 22 days (Chapter 4). In total 67, 133 and 333 g DM A. taxiformis per day was fed to the low, medium and high treatments, respectively, resulting in 84.4, 167.6 and 419.6 mg CHBr3 per day (1.26 mg CHBr3\/g DM A. taxiformis). At the end of the experiment, two animals with a consistently high seaweed intake from the low treatment were sacrificed for organ tissue sampling. Due to significant problems with the seaweed intake, and subsequently reduced DMI, the experiment was stopped prematurely on day 22, according to the experimental protocols. Throughout the experiment, several animals from all treatments were removed from the experiment due to reduced DMI, and one cow from the medium treatment was euthanized on decision by the veterinarian. At days 1 and 10 from all treatments, CHBr3 concentrations were measured in either urine or milk, but not in feces. Bromoform concentration was not detected above detection limit in milk, urine and feces at day 17, or in the collected animal tissue at the end of the experiment. Upon (histological) examination of the rumen wall, signs of inflammation of the rumen papillae became apparent. It cannot be excluded that these inflammations were caused by different condition not related to feeding A. taxiformis. These results highlight the delicate balance between safety and efficacy, and the need to better understand the fate of CHBr3 when fed to cattle.\n\nBased on the results of Chapter 4, it was hypothesized that CHBr3 could be metabolized by the cow in the rumen or post ruminal in organs like the liver. To investigate the temporal dynamics of CHBr3 dehalogenation from A. taxiformis and its effects on fermentation characteristics and microbial composition, an in vitro batch fermentation experiment was performed (Chapter 5). Substrate with or without A. taxiformis (Asparagopsis and Control, respectively) were incubated. Cumulative gas production was not affected by the addition of A. taxiformis, while cumulative CH4 production was almost completely repressed. Total VFA concentration and molar proportion of propionate did not differ between the Asparagopsis and Control treatments, while the molar proportion of acetate was lower in the Asparagopsis treatment. After 1 h of fermentation, only a small fraction of the added CHBr3 was detectable, and was below detection limit after 8 h. The concentration of dibromomethane (CH2Br2) increased markedly within 1 h and remained relatively stable up to 72 h of fermentation. No bromomethane (CH3Br) was detected. The lack of stoichiometric conversion between CHBr3 and CH2Br2 suggests that additional, unidentified brominated metabolites may have formed. Total bromine, iodine, and arsenic concentrations remained relatively stable over time. Supplementation of A. taxiformis in vitro resulted in large shifts in microbial community, including a decreased relative abundance of archaeal and ciliate species. The shifts in bacterial community generally indicate an adaptation to elevated H2 concentrations or alternative fermentation pathways. In general, in vitro CHBr3 from A. taxiformis is quickly metabolized into CH2Br2, reduces CH4 production and has a large impact on the microbial community.\n\nChapters 4 and 5 are not able to distinguish which effects are caused by the Asparagopsis seaweed, and which are caused by the active component CHBr3. To isolate the effect of CHBr3 from the seaweed, synthetic CHBr3 was infused directly into the rumen (Chapter 6). The effects on DMI, enteric CH4 and H2 production, and the temporal dynamics of these gases during and after infusion were investigated. Four non-lactating, non-pregnant, rumen-fistulated Holstein-Friesian cows were randomly assigned to 1 of 4 treatment sequences in a 4 \u00d7 4 Latin square design. In total, treatments consisted of 0 (CNTL), 59 (LOW), 192 (MED), or 592 (HIGH) mg CHBr3 per day infused into the rumen as an aqueous solution via the rumen fistula. While DMI did not significantly respond with increasing dose of CHBr3, a biologically relevant 37% decrease in DMI for HIGH compared to CNTL was observed. Both CH4 production (g\/d) and yield (g\/kg DMI) decreased quadratically, and H2 production and yield increased quadratically with increasing dose of CHBr3. Total VFA concentration did not significantly respond with increasing dose of CHBr3. Molar proportions of propionate, butyrate, valerate, and branched-chain VFA increased quadratically and molar proportion of acetate decreased quadratically with increasing dose of CHBr3. Due to reduced feed intake, the HIGH treatment in the 3rd period was early terminated, and the missing data might have resulted in lower power to detect statistical differences for both DMI and VFA. Applying separate four-parameter logistic functions to model the response in CH4 and H2 production of the HIGH treatment during and after infusions revealed delayed responses of both gasses. The decrease in CH4 production and increase in H2 production seemed to stabilize after 2-3 days of CHBr3 infusions. After cessation of the CHBr3 infusions, the increase in CH4 production and decrease in H2 production seemed to stabilize after 4-5 days. In conclusion, the increasing dose of synthetic CHBr3 indicates a trade-off between efficacy and intake, and a delayed response in enteric gas emissions at the highest dose.\n\nIn Chapter 7, the results from both research lines examining how seaweeds can contribute to reduced enteric CH4 emissions in cattle are discussed from a broader perspective. Several factors limit the use of most seaweed species as enteric CH4 inhibitors. The main limitations are related to the accumulation of minerals and heavy metals, or the too low concentrations of the hypothesized active compounds in seaweeds. Refining cultivation and processing techniques can lower the concentrations of unwanted compounds, and increase concentrations or extract active compounds to increase the potential as CH4 inhibitors, but requires time and financial resources to develop. The seaweed species belonging to the Asparagopsis genus do have high concentrations of active compounds (halogenated metabolites; e.g., CHBr3) which effectively reduce enteric CH4 production, and developments in cultivation and processing have led to several commercial applications. One example of a commercial application is the low cost method to submerge the Asparagopsis spp. seaweed in oil to extract the active compounds, and after filtration the end product contains lower levels of minerals and heavy metals than the seaweed. However, adverse effects regarding animal health and food safety have been associated with the use of Asparagopsis spp. as CH4 inhibitors, and there is too little information available for relevant authorities to evaluate the use of these seaweed-based products. For example, across multiple studies the transfer of CHBr3 to blood, milk and urine has been demonstrated, including the metabolism of CHBr3 into CH2Br2 and potentially other unknown bromine-containing metabolites. Also, the use of Asparagopsis spp, or CHBr3 based products, are associated with reduced DMI and potentially damaging the rumen wall. To control the quality, purity and dosing, and thereby preventing potential adverse effects, synthetic CHBr3 could serve as an alternative to Asparagopsis based products. However, even the use of synthetic CHBr3 is associated with reduced DMI, highlighting that the active compound plays a major role in this adverse effect. The underlying causes of these adverse effects are unknown, and several hypothesis are explored which require further investigation. In general, it can be expected that in practice lower concentrations of CHBr3 will be used compared to experimental settings, resulting in less CH4 inhibition.","auteur":"Wouter Muizelaar","auteur_slug":"wouter-muizelaar","publicatiedatum":"7 mei 2026","taal":"EN","url_flipbook":"https:\/\/ebook.proefschriftmaken.nl\/ebook\/woutermuizelaar?iframe=true","url_download_pdf":"https:\/\/ebook.proefschriftmaken.nl\/download\/892594c6-35af-4eb6-9a21-1c13697e09af\/optimized","url_epub":"","ordernummer":"18665","isbn":"","doi_nummer":"","naam_universiteit":"Wageningen University","afbeeldingen":11740,"naam_student:":"","binnenwerk":"","universiteit":"Wageningen University","cover":"","afwerking":"","cover_afwerking":"","design":""},"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/us_portfolio\/11738","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/us_portfolio"}],"about":[{"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/types\/us_portfolio"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/users\/7"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=11738"}],"version-history":[{"count":1,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/us_portfolio\/11738\/revisions"}],"predecessor-version":[{"id":11741,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/us_portfolio\/11738\/revisions\/11741"}],"wp:featuredmedia":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/media\/11739"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=11738"}],"wp:term":[{"taxonomy":"us_portfolio_category","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/us_portfolio_category?post=11738"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}