{"id":11516,"date":"2026-04-13T11:29:43","date_gmt":"2026-04-13T11:29:43","guid":{"rendered":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/portfolio\/winnie-vos\/"},"modified":"2026-04-22T14:42:14","modified_gmt":"2026-04-22T14:42:14","slug":"winnie-vos","status":"publish","type":"us_portfolio","link":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/portfolio\/winnie-vos\/","title":{"rendered":"Winnie Vos"},"content":{"rendered":"","protected":false},"excerpt":{"rendered":"","protected":false},"author":8,"featured_media":12062,"comment_status":"closed","ping_status":"closed","template":"","meta":{"_acf_changed":false,"footnotes":""},"us_portfolio_category":[45],"class_list":["post-11516","us_portfolio","type-us_portfolio","status-publish","has-post-thumbnail","hentry","us_portfolio_category-new-template"],"acf":{"naam_van_het_proefschift":"Exploring the Therapeutic Potential of Immune Checkpoint Modulation in Preclinical Models of In\ufb02ammatory Diseases","samenvatting":"Het immuunsysteem bestaat uit een groot netwerk van organen, weefsels, immuuncellen en eiwitten die de gastheer beschermen tegen schadelijke pathogenen, waaronder bacteri\u00ebn, virussen, schimmels en parasieten. Daarnaast kan het immuunsysteem kwaadaardige cellen herkennen en elimineren en kan het weefselherstel ondersteunen. Hoofdstuk 1 biedt een uitgebreide introductie over het immuunsysteem en de rol ervan in inflammatoire ziektes, met name atherosclerose. Atherosclerose, ook wel slagaderverkalking genoemd, is een chronische ontstekingsziekte waarbij de slagaders vernauwen door de ophoping van plaque in de vaatwanden. Deze plaque bestaat uit een mengsel van vetten, immuuncellen en bindweefsel. De ophoping van plaque vernauwt de slagaders en beperkt de bloedstroom, wat het risico op een hartinfarct of herseninfarct vergroot.\n\nIn dit proefschrift wordt onderzocht of immuuncheckpoints, die de ontstekingsreactie reguleren, gebruikt kunnen worden als therapie voor verschillende preklinische inflammatoire ziekten.\n\nHoofdstuk 2 onderzoekt drie verschillende E3-ubiquitine-ligases \u2013 CBL-B, Itch, en GRAIL \u2013 als potenti\u00eble doelwitten voor immunotherapie bij de behandeling van atherosclerose. E3-ubiquitine-ligases zijn enzymen die de afbraak van eiwitten reguleren en cruciaal zijn voor verschillende cellulaire processen, waaronder ontstekingsreacties. Het hoofdstuk toont aan dat verschillende E3-ubiquitine-ligases betrokken zijn bij de ontstekingsreacties die plaatsvinden bij atherosclerose. Dit biedt mogelijkheden voor nieuwe therapeutische strategie\u00ebn. Door E3-ubiquitine-ligases te moduleren, kunnen immuunreacties nauwkeurig worden afgestemd. Dit kan helpen om zowel de progressie van plaques te verlagen als bestaande plaques te stabiliseren, waardoor het risico op hart- en vaatziekten afneemt.\n\nIn hoofdstuk 3 worden de effecten van het verwijderen van de E3-ubiquitine-ligase Casitas B-lineage lymphoma-b (CBL-B) in T-cellen op de ontwikkeling van atherosclerose in muizen bestudeerd. Deze studie toont aan dat het verwijderen van CBL-B in T-cellen atherosclerose vermindert. Echter, deze verwijdering van CBL-B leidt ook tot een toename van het aantal T-cellen in atherosclerotische plaques, evenals een verhoogde systemische T-celactivatie. Dit geeft aan dat hoewel het verwijderen van CBL-B de voortgang van atherosclerose kan beperken, het tegelijkertijd een actievere immuunrespons bevordert. Dit roept vragen op over de complexe rol van CBL-B in de regulatie van ontstekingsreacties, en wat het uiteindelijke effect hiervan zal zijn op atherosclerose.\n\nDe CD40\/CD40L signaleringsroute in immuuncellen is een belangrijk mechanisme in het lichaam dat een sleutelrol speelt bij het ontstaan en verergeren van atherosclerose. CD40 is een co-stimulerend immuuncheckpoint-eiwit dat voorkomt op verschillende celtypen die betrokken zijn bij atherosclerose. Dit zijn onder andere endotheelcellen, gladde spiercellen en immuuncellen zoals macrofagen. CD40L, voornamelijk aanwezig op geactiveerde T-cellen en bloedplaatjes, bindt aan CD40 en initieert een cascade van pro-inflammatoire signalen die bijdragen aan plaquevorming en instabiliteit. Hoewel CD40L vaak wordt beschouwd als uitsluitend de initiator voor CD40 signalering, toont hoofdstuk 4 aan dat CD40L ook een omgekeerd signaal terug naar de cel kan sturen en op deze manier de activatie van T-cellen kan be\u00efnvloeden. Daarnaast wordt er een nieuwe bindingspartner voor CD40L ge\u00efdentificeerd: het eiwit \u2018receptor for activated C kinase 1\u2019 (RACK1). Ook wordt aangetoond dat CD40L signalering belangrijk is voor de polarisatie van CD4+ T-cellen naar een pro-inflammatoir T-helper 1-fenotype.\n\nImmuuncheckpointremmers verbeteren het vermogen van het immuunsysteem om tumoren te bestrijden doordat ze co-inhibitoire immuuncheckpoint-eiwitten blokkeren die normaal gesproken de ontstekingsreactie verminderen. Dit helpt het immuunsysteem om kwaadaardige cellen effectiever te herkennen en te elimineren. Hoewel immuuncheckpointremmers de behandeling van kanker enorm hebben verbeterd, kunnen ze ook onbedoelde effecten hebben op de cardiovasculaire gezondheid. Door het immuunsysteem te activeren, kunnen immuuncheckpointremmers de ontstekingsreactie versterken. Deze verhoogde ontstekingsreactie kan de plaquevorming versnellen en plaque instabiliteit verergeren, waardoor het risico op hartinfarcten en herseninfarcten verhoogt. In hoofdstuk 5 wordt een systematische review en meta-analyse gepresenteerd om de effecten van de modulatie van immuuncheckpoint-eiwitten op de progressie van atherosclerose in preklinische studies te evalueren. De resultaten tonen aan dat remming van co-inhiberende immuuncheckpoint-eiwitten atherosclerose versnelt, mogelijk door een toename van T-celinfiltratie in de plaques. Deze observatie biedt inzicht in het verhoogde risico op hart- en vaatziekten dat wordt waargenomen bij pati\u00ebnten met kanker die worden behandeld met immuuncheckpointremmers.\n\nHoewel immuuncheckpointremmers opmerkelijk succesvol zijn gebleken bij verschillende vormen van kanker, is hun effectiviteit niet altijd toereikend en bereiken veel pati\u00ebnten geen volledige of blijvende respons. Daarom worden strategie\u00ebn onderzocht om de effectiviteit van immuuncheckpointremmers te verbeteren, met als doel deze barri\u00e8res te overwinnen en de resultaten voor een breder scala aan pati\u00ebnten te optimaliseren. In hoofdstuk 6 wordt de combinatie van immuuncheckpointremmers met statines onderzocht. Statines worden vaak voorgeschreven voor cholesterolverlaging om het risico op hart- en vaatziekten te verminderen. Preklinische studies wijzen erop dat statines de effectiviteit van immuuncheckpointremmers bij kankerbehandeling kunnen vergroten, hoewel degelijke klinische onderzoeken nog ontbreken. Gezien de bewezen veiligheid en de brede beschikbaarheid van statines, vormen zij een veelbelovende en toegankelijke strategie om de effectiviteit van immuuncheckpointremmers in kankertherapie te vergroten.\n\nHet aanpakken van macrofaagontsteking bij atherosclerose is een belangrijke therapeutische strategie die gericht is op het verminderen van de chronische ontstekingsreactie die plaquevorming en plaque progressie veroorzaakt. Macrofagen zijn belangrijk in het ontstekingsproces in de plaque doordat ze cytokinen en andere pro-inflammatoire moleculen afgeven. Het beheersen van de macrofaag-gedreven ontsteking kan helpen plaques te stabiliseren. Een veelbelovende strategie is het blokkeren van de CD40-TRAF-signaalroute. CD40, een belangrijk co-stimulerend immuuncheckpoint op macrofagen, werkt samen met TRAF, een adaptereiwit, om ontstekingssignalen te versterken. Door een kleine molecuulremmer te ontwikkelen die specifiek de CD40-TRAF-interactie blokkeert (TRAFstop), wordt macrofaagactivatie en de daardoor veroorzaakte ontstekingsreactie verminderd, zonder dat het gehele immuunsysteem wordt onderdrukt. Bij Apoe-\/- muizen die behandeld werden met TRAFstop is met succes de progressie van atherosclerose verminderd, terwijl bijwerkingen tot een minimum zijn beperkt. In hoofdstuk 7 wordt TRAFstop verder ontwikkeld in een diermodel dat dichter bij de mens staat, het hypercholesterolemisch varken. De eerste data toont dat deze varkens atherosclerose ontwikkelen, maar verder onderzoek zal uitwijzen of TRAFstop de progressie van atherosclerose effectief vermindert.\n\nSecundaire hemofagocytaire lymfohistiocytose (sHLH) is een ernstige, acute ontstekingsziekte die wordt gekenmerkt door een overweldigende immuunrespons, wat leidt tot overmatige activatie van immuuncellen, met name macrofagen en T-cellen. Deze hyperactivatie resulteert in de ongecontroleerde afgifte van ontstekingscytokinen, wat leidt tot weefselschade, meervoudig orgaanfalen, en uiteindelijk de dood. sHLH kan ontstaan als het gevolg van infecties, maligniteiten of auto-immuunziekten en presenteert zich vaak met symptomen zoals koorts, vergroting van de lever of milt en cytopenie\u00ebn. Hoofdstuk 8 beschrijft een literatuurreview en een pilotstudie waarin het co-stimulerende immuuncheckpoint CD40 wordt onderzocht in verband met sHLH. De eerste resultaten tonen aan dat CD40 knock-out muizen met sHLH verlaagde niveaus van verschillende serumcytokinen hebben. Deze resultaten onderstrepen de noodzaak voor verder onderzoek naar de rol van CD40 in sHLH en het potentieel van CD40-gerichte therapie\u00ebn. TRAFstop komt naar voren als een veelbelovende therapeutische optie die zich specifiek op de activatie van macrofagen richt om de cytokinenstorm geassocieerd met sHLH te verminderen. Deze gerichte aanpak kan een effectievere en specifiekere behandeling bieden, wat mogelijk de uitkomsten voor pati\u00ebnten met deze levensbedreigende aandoening verbetert.\n\nHoofdstuk 9 biedt een algemene discussie over de bevindingen van deze thesis. De resultaten worden samengevat en in een bredere context geplaatst. Daarnaast wordt gekeken naar de toekomst en het verdere onderzoek dat nodig is voordat immuuncheckpoint-eiwitten als therapeutische strategie voor de behandeling van inflammatoire ziekten gebruikt kunnen worden.\n\nAUTHOR CONTRIBUTIONS\n\nChapter 2: TS wrote the first draft of the manuscript. TS, KP, and WV wrote the sections of the manuscript. All authors contributed to manuscript revision, read, and approved the submitted version.\n\nChapter 3: WV, TS, and EL designed the experiments and wrote the original manuscript. MdW and LAB helped editing the manuscript. WV, BvO, MdT, LB, CvR, CvT, KN, and LAB performed experiments, analysed the data and\/or interpreted the data for the manuscript. BM and MB provided resources. CW, DA, EL, TS obtained funding. All authors contributed to manuscript revision, read, and approved the submitted version.\n\nChapter 4: BvO, WV, MdW, and EL designed the experiments. BvO and EL wrote the original manuscript. WV, LAB, CvT, MH, and MdW helped editing the manuscript. BvO, WV, LAB, CvT, MdT, LB, MA, and MH performed experiments, analysed the data and\/or interpreted the data for the manuscript. EL obtained funding. All authors contributed to manuscript revision, read, and approved the submitted version.\n\nChapter 5: AS, WV, TS, and NvE conceptualized the study and wrote the original manuscript. AS and WV performed systematic review and meta-analysis. LAB, KD, PK, NH, JK, EL, and HvL provided input and revised the manuscript. All authors contributed to manuscript revision, read, and approved the submitted version.\n\nChapter 6: TS wrote the first draft of the manuscript. WV wrote sections of the manuscript. All authors contributed to manuscript revision, read, and approved the submitted version.\n\nChapter 7: WV, JW, EL designed the experiments. MtLH, JBiG, LAB, MdT, TS, BvO, LB, KW, OS, KvG, MM, LvdZvV, MvL performed experiments, analysed the data and\/or interpreted the data for the manuscript. TS and DD provided input in the experimental design. EL obtained funding.\n\nChapter 8: WV and TS designed the experiments and wrote the original manuscript. RS, MG, LAB performed experiments, analysed the data and\/or interpreted the data for the manuscript. EvH wrote sections of the literature review. MdW provided input for the experimental setup and manuscript. TS obtained funding.","summary":"The immune system is a large network of organs, tissues, immune cells, and proteins that function to protect its host against a broad spectrum of harmful pathogens, including bacteria, viruses, fungi and parasites. In addition, it plays a critical role in identifying and eliminating malignant cells, as well as facilitating tissue repair. Chapter 1 provides an elaborate introduction on the immune system and its role in inflammatory diseases, particularly atherosclerosis. Atherosclerosis is a chronic inflammatory disease in which the arteries narrow due to the buildup of plaque in the vessel walls. This plaque consists of a mixture of fats, (immune) cells, and connective tissue. The accumulation of plaque narrows the arteries and restricts blood flow, increasing the risk of a heart attack or stroke.\n\nIn this thesis, the therapeutic potential of immune checkpoints, which are crucial regulators of the immune response, is explored in various preclinical inflammatory diseases.\n\nChapter 2 explores the role of three E3 ubiquitin ligases \u2013 CBL-B, Itch, and GRAIL \u2013 as potential targets for immunotherapy in treating atherosclerotic cardiovascular disease. E3 ubiquitin ligases are enzymes that regulate protein degradation, influencing various cellular processes, including immune responses. The review suggests that targeting specific E3 ubiquitin ligases can modulate inflammatory pathways involved in atherosclerosis, potentially offering new therapeutic strategies. By fine-tuning immune responses, such therapies could reduce plaque formation and stabilize existing plaques, lowering the risk of cardiovascular events.\n\nChapter 3 examines the effects of deleting the E3 ubiquitin ligase Casitas B-lineage lymphoma-b (CBL-B), specifically in T cells, on atherosclerosis development. The study shows that deleting CBL-B in T cells reduces the overall burden of atherosclerosis. However, this deletion also leads to an increase in the number of T cells infiltrating the atherosclerotic plaque and heightens systemic T cell activation. This indicates that while a CBL-B deficiency may limit atherosclerosis progression, it simultaneously promotes a more active immune response, raising questions about the complex role of CBL-B in regulating immune function in atherosclerosis.\n\nThe CD40\/CD40L dyad is a critical signalling pathway in the development and progression of atherosclerosis. CD40 is a co-stimulatory immune checkpoint protein expressed on various cell types involved in atherosclerosis, including endothelial cells, smooth muscle cells, and immune cells such as macrophages. CD40L, primarily found on activated CD4+ T cells and platelets, binds to CD40, initiating a cascade of pro-inflammatory signals that contribute to plaque formation and plaque instability. CD40L is often considered as merely a facilitator of CD40 signalling, but Chapter 4 shows that CD40L can also reverse signal and modulate T cell activation. A novel binding partner for CD40L, protein receptor for activated C kinase 1 (RACK1), is identified. Furthermore, CD40L signalling has a significant role in the polarisation of CD4+ T cells to a pro-inflammatory T helper 1 phenotype.\n\nImmune checkpoint inhibitors improve the ability of the immune system to fight tumours by blocking co-inhibitory immune checkpoint proteins that normally reduce immune activity. This helps the immune system to recognize and eliminate malignant cells more effectively. While immune checkpoint inhibitors have revolutionized cancer treatment, they have unintended effects on cardiovascular health, particularly in the context of atherosclerotic cardiovascular disease. By stimulating the immune system, immune checkpoint inhibitors can exacerbate inflammation, which is a key driver of atherosclerosis. This heightened inflammatory response accelerates plaque formation and destabilization, increasing the risk of myocardial and cerebral infarction in patients with underlying cardiovascular conditions. In Chapter 5 a systematic review and meta-analysis are conducted to evaluate the effects of immune checkpoint modulation on atherosclerosis progression in preclinical studies. The inhibition of co-inhibitory immune checkpoint proteins accelerates atherosclerosis, potentially by increasing T cell infiltration in the plaques. This observation provides insights in the elevated cardiovascular risk observed in patients with cancer treated with immune checkpoint inhibitors.\n\nWhile immune checkpoint inhibitor therapies show remarkable success in various cancers, their efficacy is not universal, and many patients do not achieve a complete or lasting response. Consequently, researchers are exploring strategies to enhance the effectiveness of immune checkpoint inhibitors, aiming to overcome these barriers and improve outcomes for a broader range of patients. Chapter 6 explores the potential of combining immune checkpoint inhibitors with statins, a commonly prescribed drug for cholesterol reduction, to enhance cancer immunotherapy outcomes. Preclinical studies indicate that statins may boost the effectiveness of immune checkpoint inhibitors in cancer treatment, though robust clinical trials are still lacking. Given the well-established safety profiles and availability of statins, they present a promising and accessible strategy to augment immune checkpoint inhibitor efficacy in cancer therapy.\n\nTargeting macrophage inflammation in atherosclerosis is an emerging therapeutic strategy aimed at reducing the chronic inflammatory response that drives plaque formation and progression. Macrophages contribute significantly to inflammation by releasing cytokines and other pro-inflammatory molecules. Controlling this macrophage-driven inflammation could stabilise plaques and prevent cardiovascular events. One promising approach is to disrupt the CD40-TRAF signalling pathway. CD40, a key co-stimulatory immune checkpoint protein on macrophages, interacts with TRAFs, an adaptor protein, to amplify inflammatory signals. By developing a small molecule inhibitor that specifically blocks the CD40-TRAF interaction, known as TRAFstop, a reduction in macrophage activation and inflammation has been achieved without broadly suppressing the immune system. In Apoe-\/- mice, TRAFstop successfully inhibited the progression of atherosclerosis, while minimizing side effects. In Chapter 7, TRAFstop is further evaluated for its potential in reducing atherosclerosis progression in a more human-relevant animal model, the hypercholesterolaemic pig. Initial data indicates successful induction of atherosclerosis in these animals, but further analysis will determine whether TRAFstop effectively reduces atherosclerosis progression.\n\nSecondary haemophagocytic lymphohistiocytosis (sHLH) is a severe acute inflammatory disease characterised by an overwhelming immune response that can rapidly become life-threatening. The disease triggers excessive activation of immune cells, particularly macrophages and T cells. As a result, there is an uncontrolled release of pro-inflammatory cytokines that cause significant tissue damage and, if untreated, can progress to multiple organ failure. sHLH can be triggered by infections, malignancies, or autoimmune diseases and often presents with symptoms such as fever, liver or spleen enlargement, and cytopaenias. Chapter 8 describes a brief literature review and a pilot study which investigates the role of the co-stimulatory immune checkpoint CD40 in sHLH. Initial data show that CD40-\/- mice with sHLH have reduced levels of several serum cytokines compared to wild-type mice with sHLH. These data underscore the need for further investigation into the role of CD40 in sHLH and the potential of CD40-targeted therapies. TRAFstop emerges as a promising therapeutic option, specifically targeting macrophage activation to mitigate the cytokine storm associated with sHLH. This targeted approach could offer a more effective and specific treatment, potentially improving outcomes for patients suffering from this life-threatening condition.\n\nChapter 9 presents a comprehensive discussion of the findings presented in this thesis. The results are summarized and contextualized within a broader framework. Furthermore, the discussion emphasizes future directions and the additional research required to advance immune checkpoint modulation as a therapeutic strategy for treating inflammatory diseases.","auteur":"Winnie Vos","auteur_slug":"winnie-vos","publicatiedatum":"20 maart 2025","taal":"EN","url_flipbook":"https:\/\/ebook.proefschriftmaken.nl\/ebook\/winnievos?iframe=true","url_download_pdf":"","url_epub":"","ordernummer":"FTP-202604131125","isbn":"978-94-6510-441-6","doi_nummer":"","naam_universiteit":"Universiteit van Amsterdam","afbeeldingen":12062,"naam_student:":"","binnenwerk":"","universiteit":"Universiteit van Amsterdam","cover":"","afwerking":"","cover_afwerking":"","design":""},"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/us_portfolio\/11516","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/us_portfolio"}],"about":[{"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/types\/us_portfolio"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/users\/8"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=11516"}],"version-history":[{"count":1,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/us_portfolio\/11516\/revisions"}],"predecessor-version":[{"id":11519,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/us_portfolio\/11516\/revisions\/11519"}],"wp:featuredmedia":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/media\/12062"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=11516"}],"wp:term":[{"taxonomy":"us_portfolio_category","embeddable":true,"href":"https:\/\/www.proefschriftmaken.nl\/en\/wp-json\/wp\/v2\/us_portfolio_category?post=11516"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}